EB病毒與T細(xì)胞性淋巴瘤的相關(guān)性研究及T細(xì)胞性淋巴瘤患者血清對人造血干-祖細(xì)胞集落形成的影響.pdf

1、本文主要就EB病毒與T細(xì)胞性淋巴瘤的相關(guān)性研究及T細(xì)胞性淋巴瘤患者血清對人造血干/祖細(xì)胞集落形成的影響進(jìn)行了研究，文章內(nèi)容如下： 第1章 EB病毒與T細(xì)胞性淋巴瘤的相關(guān)性研究 【目的】：本研究旨在進(jìn)一步了解T-NHL患者的EBV血清學(xué)抗體及外周血游離EBV DNA的表達(dá)情況，并探索EBV表達(dá)水平與T-NHL的臨床特征、療效、預(yù)后的相關(guān)性。 【方法】： 2002年1月9日——2006年12月19日經(jīng)病理學(xué)證

2、實(shí)為T-NHL的125例患者入組本研究，收集其外周血標(biāo)本，通過免疫學(xué)方法測定血清EBV抗體VCA-IgA、EA-IgA：通過real-time PCR技術(shù)檢測外周血游離EBV DNA拷貝數(shù)，分析各檢測指標(biāo)與患者臨床特征、療效、預(yù)后之間的關(guān)系。 【結(jié)果】： 全組患者VCA-IgA、EA-IgA陽性率分別為30.6﹪(38/124)和1.6﹪(2/124)；其中年輕患者(<60歲)的VCA-IgA陽性率高于老年患者(≥60歲

3、)(35.3﹪vs9.1﹪，P=0.016)，：有B癥狀的患者VCA-IgAIIEl性率高于無B癥狀的患者(38.8﹪vs21.1﹪，P=0.033)。VCA-IgA、EA-IgA陽性率與T-NHL患者療效、預(yù)后無明顯關(guān)系。全組患者外周血游離EBV DNA濃度及陽性率分別為13400copies/ml(中位數(shù))、39.2﹪(49/125)，各亞型淋巴瘤的外周血游離EBV DNA陽性率之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)，以結(jié)外鼻型NK/T

4、細(xì)胞性淋巴瘤陽性率最高(69.4﹪，34/49)。全組患者中有結(jié)外侵犯、B癥狀、上呼吸道侵犯(包括鼻咽、鼻腔、鼻竇、口咽、扁桃體、喉咽)、血象異常(一系或以上檢測值低于正常值低限)、肝功能異常(排除化療引起)、β<,2>微球蛋白(β<,2>MG)升高的患者外周血游離EBV DNA陽性率更高，分別為45.1﹪、54.4﹪、62.3﹪、53.5﹪、90.0﹪、59.3﹪；外周血游離EBV DNA高濃度組較低濃度組更多見骨質(zhì)破壞和/或皮膚侵犯

5、(45.8﹪vs 16.0﹪，P=0.024)。全組患者外周血游離EBV DNA陽性組較陰性組完全緩解率低(38.8﹪VS57.9﹪)，復(fù)發(fā)率高(42.1﹪VSl8.2﹪)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.037，P=0.045)。隨著外周血游離EBV DNA濃度升高，全組患者5年無疾病生存率(陰性組74.4﹪vs低濃度組62.9﹪vs高濃度組25.7﹪，P=0.015)及5年總生存率(陰性組60.2﹪vs低濃度組52.6﹪vs高濃度組42.

6、9﹪，P=0.03)呈線性下降。組間差異性比較顯示DFS在外周血游離EBV DNA陰性組與高濃度組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(X<'2>=8.845，P=0.003)；OS在陰性組與高濃度組、低濃度組與高濃度組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(陰性組VS高濃度組：X<'2>=9.363，P=0.002；低濃度組VS高濃度組X<'2>=4.322，P=0.038)。亞組分析顯示，結(jié)外鼻型NK/T細(xì)胞性淋巴瘤中，外周血游離EBV DNA陽性組較陰性組完全緩解率低(2

7、9.4﹪vs73.3﹪，P=0.004)，但兩組間復(fù)發(fā)率、無疾病生存率及總生存率之間無差別(復(fù)發(fā)率：40.0﹪vs9.1﹪，P=0.097；5年無疾病生存率50.6﹪vs83.3﹪，P=0.103；5年總生存率51.3﹪vs7301﹪，P=0.093)。外周血游離EBV DNA濃度與EBV血清學(xué)抗體在TNHL中的表達(dá)有一致性(Kappa值=0.187，P=0.034)。 【結(jié)論】： T-NHL，尤其是結(jié)外鼻型NKI/T細(xì)

8、胞淋巴瘤有較高的EBV感染率。外周血游離EBV DNA與EBV血清學(xué)抗體在T-NHL中的表達(dá)有一致性。T-NHL患者中有結(jié)外侵犯、B癥狀、上呼吸道侵犯、血象異常、肝功能異常、β<,2>MG升高的外周血游離EBV DNA陽性率更高。外周血游離EBV DNA高濃度組較低濃度組的T-NHL更多出現(xiàn)骨質(zhì)破壞和/或皮膚侵犯。外周血游離EBV DNA陽性組較陰性組的T-NHL患者完全緩解率低，復(fù)發(fā)率高；隨著外周血游離EBV DNA濃度升高，T-NH

9、L患者的生存率呈線性降低。 第2章 T細(xì)胞性淋巴瘤患者血清對造血干/祖細(xì)胞的影響 【目的】： 本研究旨在檢測初治T-NHL及HPS發(fā)生率較高的亞型(結(jié)外鼻型NK/T細(xì)胞性淋巴瘤)患者血清對人造血干/祖細(xì)胞的生長有無抑制作用，評價(jià)T-NHL初治患者血清的預(yù)測HPS發(fā)生的價(jià)值；探討外周血游離EBV DNA濃度與在T-NHL初治患者血清的作用下人造血干/祖細(xì)胞集落數(shù)目的相關(guān)性。 【方法】： 本研究通過體

10、外造血干/祖細(xì)胞集落培養(yǎng)法，檢測擬研究的血清對造血干/祖細(xì)胞的集落生長的影響。留取正常人(A組，10例)、未經(jīng)抗腫瘤治療B細(xì)胞性淋巴瘤患者(B組，15例)、未經(jīng)抗腫瘤治療T細(xì)胞性淋巴瘤患者(C組，12例)、未經(jīng)抗腫瘤治療的結(jié)外鼻型NK/T細(xì)胞性淋巴瘤患者(D組，16例)血清標(biāo)本，所有患者治療前血象、骨髓象、肝功能均正常。分離自體干細(xì)胞移植前的彌漫大B細(xì)胞性淋巴瘤患者動(dòng)員后外周血中的單個(gè)核細(xì)胞，將含5*10<'5>/ml單個(gè)核細(xì)胞的IMD

11、M懸液30ul，分別與各血清標(biāo)本300ul混勻后加至甲基纖維素半固體培養(yǎng)基中，于370C、5﹪CO<,2>、飽和濕度條件下培養(yǎng)14天，記錄粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞祖細(xì)胞集落(CFU-GM)數(shù)、爆發(fā)式紅細(xì)胞集落(BFU-E)數(shù)及總集落數(shù)。用real-time PCR技術(shù)測定結(jié)外鼻型NK/T細(xì)胞性淋巴瘤患者外周血游離EBV DNA濃度，對外周血游離EBV DNA濃度與患者血清作用下集落形成數(shù)目進(jìn)行相關(guān)分析。采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行各組樣本均數(shù)間的比較。

12、 【結(jié)果】：A、B、C、D四組血清均作用于同一來源的動(dòng)員外周血干細(xì)胞，后者形成的總集落數(shù)(個(gè)/ml)分別為109.10±31.40、100.13±36.19、88.04±66.96、129.94±39.28，其中GM-CFU集落分別為44.75±31.64、21.90±15.94、24.75±17.73、94、38.56±26.43；BFU-E集落分別為64.35±27.26、74.93±45.02、92.06±39.44、63.11

13、±57.64。D組結(jié)外鼻型NK/T細(xì)胞性淋巴瘤中13例送檢外周血游離EBV DNA濃度的患者，外周血游離EBV DNA陽性率為84.61﹪(11/13)，對EBV DNA濃度與患者血清作用下造血干/祖細(xì)胞形成的集落數(shù)繪制散點(diǎn)圖，并進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示二者之間無明顯相關(guān)性(Pearson相關(guān)系數(shù)-0.068，P=0.826)。 【結(jié)論】： 初治血象正常的T-NHL、結(jié)外鼻型NK/T細(xì)胞性淋巴瘤患者的血清與B-NHL、正常