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文檔簡介
1、胃癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤,中國胃癌發(fā)病人數(shù)約占世界胃癌發(fā)病人數(shù)的50%。近年來,雖然胃癌的綜合治療已取得了長足的進(jìn)步,但是胃癌的發(fā)病率及死亡率未見明顯下降。浸潤和轉(zhuǎn)移是影響胃癌預(yù)后的主要因素。大多數(shù)研究表明胃癌的浸潤轉(zhuǎn)移是多基因、多因素、多階段改變的結(jié)果。研究胃癌發(fā)生相關(guān)基因及其蛋白表達(dá)產(chǎn)物,不僅對于了解胃癌發(fā)病機(jī)制十分重要,而且對于其臨床分子診斷及預(yù)后也同樣重要。SIRT3隸屬于沉默信息調(diào)節(jié)因子2(silence informat
2、ion negulator2,sir2)相關(guān)酶類Sirtuins家族,研究證實(shí)SIRT3是線粒體中最主要的去乙?;?它作用于多種酶參與氧化途徑的激活,調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)穩(wěn)態(tài),參與能量代謝并影響機(jī)體的衰老、細(xì)胞死亡和腫瘤發(fā)生。SIRT3在不同腫瘤中的表達(dá)水平不夠統(tǒng)一,對腫瘤發(fā)生是抑制作用還是促進(jìn)作用尚存爭議。缺氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxia-inducible factor-1,H
3、IF-1)是缺氧條件下廣泛存在于哺乳動物和人體內(nèi)產(chǎn)生的一種異源二聚體轉(zhuǎn)錄因子。HIF-1由HIF-1α和HIF-1β兩個亞單位組成,其中HIF-1α是唯一的氧調(diào)節(jié)亞單位,它決定HIF-1的活性,其靶基因參與編碼葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、糖酵解酶及血管生成。有研究顯示,腫瘤組織中 SIRT3的表達(dá)缺失或降低,可以增加HIF-1α的穩(wěn)定性,具體機(jī)制尚不明確。本文通過檢測SIRT3、HIF-1α蛋白的表達(dá)水平,來探討SIRT3、HIF-1α在胃癌發(fā)生及
4、發(fā)展中的生物學(xué)作用及二者在胃癌中的相關(guān)性。
第一部分 SIRT3在胃癌中的表達(dá)及臨床意義
目的:
通過檢測SIRT3蛋白在胃癌中表達(dá),分析SIRT3表達(dá)水平與胃癌臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性,探討SIRT3在胃癌形成過程中的生物學(xué)作用。
方法:
收集秦皇島市第一醫(yī)院2012年1月至2013年10月手術(shù)全切除的胃癌石蠟標(biāo)本80例,50例正常胃粘膜組織石蠟標(biāo)本(距離癌組織5cm以上未被癌細(xì)胞侵及的
5、切緣組織)做對照,用免疫組化方法檢測 SIRT3在胃癌組織及正常胃粘膜組織中的表達(dá),觀察 SIRT3在胃癌中的表達(dá)情況,分析其表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性。收集2013年1月至2013年10月的手術(shù)切除的30例新鮮胃癌組織標(biāo)本及對應(yīng)的正常胃粘膜組織(距離癌灶5cm以上的癌旁組織),利用Western-blotting方法檢測SIRT3在胃癌組織及正常胃粘膜組織中的表達(dá)量。
結(jié)果:
1免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果 SIRT3蛋白在
6、胃癌組織中的陽性表達(dá)率為53.8%(43/80);在正常胃粘膜組織中的陽性表達(dá)率為86.0%(43/50)。胃癌組織 SIRT3陽性表達(dá)率明顯低于癌旁正常胃粘膜組織中,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2 SIRT3在胃癌組織中的表達(dá)水平與性別、年齡、腫瘤大小、分化程度無關(guān)(P>0.05);與浸潤深度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及 TNM分期相關(guān)(P<0.05)。
3 Western-blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果 SIRT3在胃
7、癌組織的蛋白表達(dá)量(SIRT3/β-actin)(0.6551±0.3170)低于癌旁正常胃粘膜組織蛋白表達(dá)量(0.8029±0.3290),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
SIRT3在胃癌組織中的表達(dá)低于正常胃粘膜組織,其表達(dá)水平與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān),提示SIRT3在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中可能起抑制作用。
第二部分 HIF-1α在胃癌中的表達(dá)及臨床意義、SIRT3與HIF-1α
8、的相關(guān)分析
目的:
觀察HIF-1α在胃癌中的表達(dá),分析HIF-1α表達(dá)水平與胃癌臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性,分析SIRT3、HIF-1α二者在胃癌發(fā)生及發(fā)展過程中相關(guān)性。
方法:
用免疫組化方法檢測HIF-1α在80例胃癌石蠟標(biāo)本,50例正常胃粘膜組織石蠟標(biāo)本的表達(dá),觀察HIF-1α在胃癌的表達(dá)情況,分析其表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性。Spearman等級相關(guān)分析探討SIRT3與HIF-1α的相關(guān)性
9、。
結(jié)果:
1免疫組化結(jié)果HIF-1α在胃癌組織中的陽性表達(dá)率為75%(60/80),在正常胃粘膜組織中,無陽性表達(dá)。胃癌組織HIF-1α陽性表達(dá)率明顯高于癌旁正常胃粘膜組織中,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2胃癌組織中 HIF-1α的表達(dá)水平與性別、年齡、分化程度無關(guān)(P>0.05);與腫瘤大小、浸潤深度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及 TNM分期相關(guān)(P<0.05)
3胃癌組織中SIRT3與HIF-
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