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文檔簡介
1、試驗(yàn)一旨在研究日糧硝酸鹽水平對湖羊瘤胃硝態(tài)氮動態(tài)消失率和發(fā)酵特性的影響。選取6頭9月齡,體況良好,體重相近(30±5) kg且裝有永久性瘺管的湖羊,采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),試驗(yàn)分為6期,每期14d,采樣期2d,每期日糧(DM基礎(chǔ))添加硝酸鉀的劑量分別為:對照組0%、1%、2%、3%、4%、5%,測定喂前及喂后0.5、1、1.5、2、4、6、8h瘤胃液硝酸鹽和亞硝酸鹽含量及瘤胃發(fā)酵參數(shù)。晨飼后2h通過頸靜脈采血,測定高鐵血紅蛋白含量。第一期結(jié)束
2、后采集瘤胃液進(jìn)行體外培養(yǎng),并使用ANKOM RFS產(chǎn)氣測量系統(tǒng)測定凈產(chǎn)氣量。結(jié)果表明:高鐵血紅蛋白的含量隨硝酸鹽添加量的增加而顯著升高(P<0.01),最高達(dá)0.32%。湖羊在采食1h后瘤胃液硝酸鹽含量達(dá)到最高(0.95~2.14 g/L),亞硝酸鹽含量在喂后1.5 h達(dá)到最高(0.93~6.22 tmol/L)。添加硝酸鹽顯著提高瘤胃液pH值(P<0.01)和喂后2h的氨態(tài)氮含量(P<0.01)以及乙酸/丙酸的比例,添加量高于3%會降
3、低微生物蛋白和總揮發(fā)性脂肪酸的含量,硝酸鹽添加量為2%時(shí)微生物蛋白和總揮發(fā)性脂肪酸的合成量最高,最有利于微生物發(fā)酵。體外產(chǎn)氣試驗(yàn)結(jié)果表明,各組產(chǎn)氣速率無顯著差異,5%組凈產(chǎn)氣量有下降趨勢(P<0.1)。
試驗(yàn)二旨在研究日糧硝酸鹽水平對瘤胃細(xì)菌群落的影響。采樣期飼喂前采集瘤胃液,提取總DNA,利用Illumina Miseq平臺對16S V4區(qū)測序及Real-time PCR分析。結(jié)果表明,湖羊瘤胃中Bacteroidetes、
4、 Firmicutes、Proteobacteria、Fibrobacteres、 Verrucomicrobia的總和占細(xì)菌群落總數(shù)的90%以上,為瘤胃中的優(yōu)勢菌門。屬水平上各組中均以Prevotella、Selenomonas、Succinivibrio為優(yōu)勢菌屬,平均比例分別為47.87%、5.76%、2.37%。各組間Shanon指數(shù)無顯著差異。Chao1指數(shù)隨硝酸鹽添加量的增加而升高,5%組顯著高于對照組(P<0.05)。添加
5、硝酸鹽能夠提高湖羊瘤胃細(xì)菌的豐度,但不會改變瘤胃細(xì)菌的多樣性和菌群結(jié)構(gòu)。Real-time PCR結(jié)果顯示,Campylobacter fetus的相對倍數(shù)隨硝酸鹽的添加量的增加而增高,5%組相對倍數(shù)最高,差異極顯著(P<0.01)。
試驗(yàn)三旨在研究日糧中硝酸鹽水平對湖羊瘤胃真菌和原蟲區(qū)系的影響。采樣期飼喂前采集瘤胃液,提取總DNA,擴(kuò)增18S V4區(qū),利用Illumina Miseq測序平臺進(jìn)行測序并對結(jié)果進(jìn)行生物信息學(xué)分析
6、。結(jié)果表明,日糧中添加硝酸鹽對Shannon指數(shù)和Chao1指數(shù)無顯著影響,不會改變湖羊瘤胃真菌、原蟲的多樣性。湖羊瘤胃優(yōu)勢真菌為Saccharomyces、Malassezi、Phaeosphaeria、Davidiella、 Issatchenkia,對照組的Saccharomyces相對豐度顯著高于2%、3%、5%組,其他各處理組的真菌屬無顯著差異;原蟲屬中,2%組的Unculture屬相對豐度極顯著高于其他處理組(P<0.01)
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