大鼠胰島β細胞衰老及其胰島素分泌功能的研究.pdf

1、目的:2型糖尿病(T2 DM)是常見病,近些年來,隨著生活水平的提高,其患病人數(shù)迅速增加,已成為嚴重威脅人類健康的世界性公共衛(wèi)生問題。T2 DM的發(fā)病機制至今尚未明了,深入研究T2 DM的發(fā)病機制,將有利于T2 DM的預防和治療,從而使整個人類受益。目前研究顯示,T2 DM是環(huán)境因素與遺傳共同作用所引起的,環(huán)境因素(飲食結構及衰老)可能起主要作用。流行病學調查表明,隨年齡增長,糖耐量下降,T2 DM患病率升高;然而,這一趨勢的機制目前仍

2、未完全清楚。另外,足夠的證據證實,T2 DM患者普遍存在β細胞數(shù)量和胰島素分泌功能缺陷,在非 DM老年人中,也存在胰島素分泌受損。這些資料提示T2 DM似乎與機體的衰老有關。細胞衰老是機體衰老的前體,因此,我們提出假設:β細胞衰老可能參與T2 DM的發(fā)病。本研究旨在研究増齡或限制能量攝入(CR)對胰島細胞衰老及胰島素分泌的影響。
　　方法:
　?、?8個月SD大鼠予限制能量攝入(給予正常飲食量60％)6個月以建立CR動物模型

3、。
　?、诓煌慢g(新生、1個月、6個月、24個月)及CR組(每組各10只) SD大鼠處死,取胰腺。
　?、勖庖呓M化檢測胰島素及細胞衰老分子標志 p16在各組大鼠胰島的表達。
　?、堞?gal染色檢測細胞衰老標志β-半乳糖苷酶在各組大鼠胰島的表達。
　　結果:
　?、匐S年齡增長,胰島內p16表達(胰島內p16免疫組化染色陽性細胞數(shù)/每個胰島有核細胞總數(shù))增加。新生組大鼠胰島內p16未見表達,p16在其它各年

4、齡組大鼠胰島的表達為1月組0.00267±0.01534 vs.6月組0.05290±0.01787 vs.24月組0.24526±0.03191)(P<0.01);β-Gal染色陽性(陽性率、著色面積、著色深淺程度)增加也與增齡相關,新生組大鼠胰島β-Gal染色均為陰性,其它各組陽性率為1月組2% vs.6月組15% vs.24月組100%(P<0.01),著色面積為1月組0.04 vs.6月組0.218 vs.24月組2.118,著

5、色程度為1月組0.04 vs.6月組0.18 vs.24月組2.412。
　　②從新生組大鼠到6個月組大鼠,隨年齡增加,胰島內胰島素表達逐漸增加(新生組165.1±31.3 vs.1月組206.5±29.8 vs.6月組239.0±32.8)(P<0.05);24個月與6個月大鼠相比較,胰島內胰島素表達減少(187.8±26.0 vs.239.0±32.8)(P<0.01)。
　?、?CR組與同齡對照組相比,胰島內p16表達

6、減少(0.19130±0.02852 vs.0.24526±0.03191)(P<0.01)。CR組與同齡對照組相比,胰島內β-Gal染色陽性(陽性率、著色面積、著色深淺程度)減少,CR組陽性率為84%,而同齡對照組為100%(P<0.01);CR組著色面積為1.672,而同齡對照組為2.118;CR組著色程度為1.725,而同齡對照組為2.412。
　?、?CR組與同齡對照組相比,胰島素表達增加(201.7±35.3 vs.18