新生鼠腎積水病腎損害程度的檢測(cè)及臨床意義.pdf

1、目的：通過(guò)腰大肌壓迫輸尿管法，建立生后48小時(shí)內(nèi)的新生Wistar鼠腎積水動(dòng)物模型，檢測(cè)輸尿管梗阻期間及梗阻解除后病腎組織和腎盂尿中一系列細(xì)胞因子：如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）、單核細(xì)胞趨化因子-1（MCP-1）、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）、內(nèi)皮素-1（ET-1）轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平表達(dá)的改變，以及尿中含量的變化，擬從分子水平探尋評(píng)定先天性腎積水術(shù)前病腎損害程度以及術(shù)后病腎恢復(fù)的客觀、可靠指標(biāo)，為臨床小兒腎積水治療方法的選

2、擇及術(shù)后療效預(yù)測(cè)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 1、動(dòng)物模型制作：建立先天性腎積水的動(dòng)物模型（即腰大肌壓迫輸尿管法制作部分輸尿管梗阻及梗阻解除的動(dòng)物模型）。取生后48h內(nèi)的新生Wistar鼠72只，隨機(jī)分6組，每組12只；隨機(jī)選擇1組行假手術(shù)，作為對(duì)照組，余5組用腰大肌壓迫法制作左側(cè)部分輸尿管梗阻模型，然后再隨機(jī)分為組2-組6。組1（對(duì)照組）：假手術(shù)組；組2：梗阻后3周處死；組3：梗阻后3周解除梗阻，解除梗阻后2周處

3、死；組4：梗阻后3周解除梗阻，解除梗阻后6周處死；組5：梗阻后3周解除梗阻，解除梗阻后8周處死；組6：梗阻后3周解除梗阻，解除梗阻后12周處死。
　　 2、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的檢測(cè)：（1）、HE染色行病腎組織結(jié)構(gòu)改變的檢查，并做病理分級(jí)；（2）、檢測(cè)病腎組織TGF-β1、MCP-1、ET-1、IGF-1轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平在梗阻期間及梗阻解除后的改變；（3）、檢測(cè)病腎尿TGF-β1、MCP-1、ET-1、IGF-1在梗阻期間及梗阻解除后的變

4、化。
　　 結(jié)果：
　　 1、新生鼠梗阻性腎積水動(dòng)物模型成功建立，病腎組織經(jīng)HE染色后，參照Elder等的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病理分級(jí)，對(duì)照組12例全部為Ⅰ級(jí)，實(shí)驗(yàn)組（死亡9例，存活51例）Ⅰ級(jí)7例，Ⅱ級(jí)13例，Ⅲ級(jí)20例，Ⅳ級(jí)11例，Ⅴ級(jí)0例；病腎組織結(jié)構(gòu)改變隨梗阻解除時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸恢復(fù)。
　　 2、病腎組織內(nèi)TGF-β1、MCP-1、ET-1、IGF-1轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平的表達(dá)變化：
　　 （1）、TGF-β1、

5、MCP-1、ET-1mRNA的表達(dá)在梗阻后隨病理分級(jí)的增加而遞增，其中TGF-β1在各病理分級(jí)組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），MCP-1、ET-1在不同病理分級(jí)組間比較，差異不全有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；IGF-1雖隨病理分級(jí)的增加而遞減，但在各病理分級(jí)組間比較，差異不全有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TGF-β1、MCP-1、ET-1蛋白水平的表達(dá)也隨病理分級(jí)的增加而遞增，而IGF-1則隨病理分級(jí)的增加而遞減。
　　 （2）、梗阻解除后，隨梗

6、阻解除時(shí)間的延長(zhǎng)TGF-β1、MCP-1、ET-1轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平的表達(dá)逐漸下降，其中梗阻解除后12周TGF-β1水平已降至正常，而IGF-1轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平的表達(dá)則逐漸升高。
　　 3、病腎腎盂尿內(nèi)TGF-β1、MCP-1、ET-1及IGF-1水平的改變：
　　 （1）、病腎尿TGF-β1、MCP-1、ET-1在梗阻后隨病理分級(jí)的增加而遞增，其中TGF-β1在各病理分級(jí)組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），

7、MCP-1、ET-1在不同病理分級(jí)組間比較，差異不全有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；IGF-1雖隨病理分級(jí)的增加而遞減，但在各病理分級(jí)組間比較，不全有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 （2）、梗阻解除后，隨梗阻解除時(shí)間的延長(zhǎng)病腎尿TGF-β1、MCP-1、ET-1的含量逐漸升高，其中梗阻解除后12周尿TGF-β1水平已降至正常，而尿IGF-1的含量則隨梗阻解除時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸下降。
　　 結(jié)論：
　　 1、本研究通過(guò)腰大肌壓迫輸尿管法成功地制作了

8、新生鼠腎積水的動(dòng)物模型（新生鼠部分輸尿管梗阻建立及梗阻解除的動(dòng)物模型），可作為臨床研究小兒腎積水的理想動(dòng)物模型。
　　 2、新生鼠腎積水病腎組織TGF-β1轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平在各病理分級(jí)組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且在梗阻解除術(shù)后12周已降至正常，可用于判定病腎的損害程度以及恢復(fù)情況。
　　 3、新生鼠腎積水病腎尿TGF-β1在梗阻后各病理分級(jí)組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且在梗阻解除術(shù)后12周已恢復(fù)至正常，是評(píng)定腎積