白藜蘆醇保護腦缺血-再灌注損傷的自噬途徑研究.pdf

1、目的:白藜蘆醇(Resveratrol，Res)是一種多酚類化合物，具有保護心腦血管、抗癌和抗炎等多種生物學活性。然而Res對腦缺血保護的作用機制尚未明確。本文研究Res對大鼠局灶性腦缺血/再灌注損傷中自噬的影響及可能調(diào)控途徑，進一步明確Res保護腦缺血再灌注損傷的機制。
　　方法:SPF級SD雄性大鼠88只，隨機分為4組，假手術組(S組)、模型組（M組）、Res15mg/kg處理組（R1組）和Res40mg/k處理組（R2組），

2、其中R2組另設3-MA（自噬抑制劑）+R2組和Sirtinol（Sirt1抑制劑）+R2組。線栓法制備大鼠大腦中動脈阻塞(MCAO)模型，每組再灌注24h后，觀察大鼠神經(jīng)功能評分;尼氏染色法觀察神經(jīng)細胞的損傷情況;透射電鏡(TEM)法觀察神經(jīng)元的超微結(jié)構(gòu)及其內(nèi)自噬空泡數(shù)量的變化;免疫組化、RT-PCR和Westem blotting分別檢測沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關蛋白1(Sirtuins1，Sirt1)，微管相關蛋白輕鏈3(microtu

3、bule-associated protein light chain3，LC3)和Beclin1的核酸和蛋白表達;TTC染色法測定Res和自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA）對腦梗死體積的影響;免疫熒光雙標法檢測Sirt1抑制劑Sirtinol預處理對Sia1+LC3陽性細胞表達的影響。
　　結(jié)果:與M組相比，Res可顯著減輕大鼠腦缺血/再灌注損傷的神經(jīng)功能評分(P＜0.05);Res可減輕大腦皮

4、質(zhì)神經(jīng)元的基本病變，增加尼氏體的數(shù)量;使自噬泡數(shù)量明顯增加;與S組相比，腦缺血能明顯上調(diào)Sirt1和LC3在mRNA和蛋白水平的表達，Res可使二者的表達進一步上調(diào)，且R2組更明顯（均P＜0.05）;TTC染色顯示，Res能減少腦梗死體積(P＜0.05)，其作用可被自噬抑制劑3-MA拮抗（P＜0.05）。免疫熒光雙標顯示，Sirtinol預處理能明顯抑制Res誘導的Sirt1及LC3的表達（P＜0.05）。
　　結(jié)論:Res可通過