白藜蘆醇對(duì)大鼠心臟缺血—再灌注損傷保護(hù)機(jī)制的研究.pdf

1、目的:心臟的缺血一再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)損傷是臨床上一種常見(jiàn)的病理生理過(guò)程。已有的研究報(bào)道，白藜蘆醇對(duì)大鼠心臟的缺血-再灌注損傷具有保護(hù)作用，但其機(jī)制沒(méi)有被完全闡明。本文主要從細(xì)胞和離體兩方面來(lái)探討白藜蘆醇對(duì)心臟I/R損傷的保護(hù)機(jī)制。
　　方法:利用魚(yú)藤酮處理大鼠心肌細(xì)胞(H9c2)，制成I/R細(xì)胞模型，利用Calcein-AM，PI熒光染色評(píng)估白藜蘆醇對(duì)缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，siRNA抑制

2、基因表達(dá)，DCFA熒光染色檢測(cè)ROS的產(chǎn)生，并利用AnnexinⅤ/PI凋亡試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡;取雄性SD大鼠的離體心臟進(jìn)行l(wèi)angendorff灌流實(shí)驗(yàn)，分別記錄缺血前后+dp/dt，-dp/dt、LVDP、LVEDP及心率的變化;ELISA試劑盒檢測(cè)大鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)的釋放量，石蠟切片HE染色檢測(cè)心臟組織的損傷，并用TTC染色法檢測(cè)心臟的梗死面積。綜合運(yùn)用Real-timePCR和Western blot技術(shù)，在心臟組

3、織和細(xì)胞水平檢測(cè)抗氧化基因MnSOD及相關(guān)蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:與未治療組相比，白藜蘆醇可以明顯抑制H9c2細(xì)胞的死亡、凋亡和ROS的產(chǎn)生;在心臟的灌流心臟中，白藜蘆醇組大鼠的心臟功能明顯改善，與此同時(shí)，灌流液中CK-MB的釋放、心臟的損傷及心臟的梗死面積明顯減小;在細(xì)胞及組織水平上，VEGF-B和MnSOD的mRNA及蛋白表達(dá)和Akt、GSK3β蛋白的磷酸化水平均明顯增加;沉默VEGF-B后，抑制了VEGF-B/Akt/GSK