白藜蘆醇對大鼠心臟缺血—再灌注損傷保護機制的研究.pdf

1、目的:心臟的缺血一再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)損傷是臨床上一種常見的病理生理過程。已有的研究報道，白藜蘆醇對大鼠心臟的缺血-再灌注損傷具有保護作用，但其機制沒有被完全闡明。本文主要從細胞和離體兩方面來探討白藜蘆醇對心臟I/R損傷的保護機制。
　　方法:利用魚藤酮處理大鼠心肌細胞(H9c2)，制成I/R細胞模型，利用Calcein-AM，PI熒光染色評估白藜蘆醇對缺血再灌注損傷的保護作用，siRNA抑制

2、基因表達，DCFA熒光染色檢測ROS的產(chǎn)生，并利用AnnexinⅤ/PI凋亡試劑盒檢測細胞凋亡;取雄性SD大鼠的離體心臟進行l(wèi)angendorff灌流實驗，分別記錄缺血前后+dp/dt，-dp/dt、LVDP、LVEDP及心率的變化;ELISA試劑盒檢測大鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)的釋放量，石蠟切片HE染色檢測心臟組織的損傷，并用TTC染色法檢測心臟的梗死面積。綜合運用Real-timePCR和Western blot技術(shù)，在心臟組

3、織和細胞水平檢測抗氧化基因MnSOD及相關(guān)蛋白的表達。
　　結(jié)果:與未治療組相比，白藜蘆醇可以明顯抑制H9c2細胞的死亡、凋亡和ROS的產(chǎn)生;在心臟的灌流心臟中，白藜蘆醇組大鼠的心臟功能明顯改善，與此同時，灌流液中CK-MB的釋放、心臟的損傷及心臟的梗死面積明顯減小;在細胞及組織水平上，VEGF-B和MnSOD的mRNA及蛋白表達和Akt、GSK3β蛋白的磷酸化水平均明顯增加;沉默VEGF-B后，抑制了VEGF-B/Akt/GSK