中國人群胃癌樣本中MET、HER-2、EGFR及TGF1R蛋白的表達(dá)及激活調(diào)節(jié)研究.pdf

1、背景：盡管10年來全球范圍內(nèi)胃癌的發(fā)病率持續(xù)下降，其仍然是引起死亡的主要腫瘤之一。早期診斷率的提高顯著增加了手術(shù)根治病人的數(shù)量，但胃癌復(fù)發(fā)率高，晚期胃癌患者預(yù)后差。近年來隨著生物靶向藥物的不斷發(fā)展，其在胃癌治療中的應(yīng)用也得到越來越多的關(guān)注。
　　 MET、HER-2、EGFR及IGF1R是位于胃癌細(xì)胞表面由原癌基因編碼的對下游信號激活有重要意義的受體酪氨酸激酶(RTKs)。由于這些蛋白的過表達(dá)或激活可通過多種方式激發(fā)下游的信號級

2、聯(lián)反應(yīng)，引起腫瘤細(xì)胞一系列生物學(xué)行為的改變，它們已成為胃癌領(lǐng)域有重要意義的藥物靶點(diǎn)。既往研究證實(shí)，MET、HER2、EGFR及IGF1R介導(dǎo)的信號通路間存在交叉位點(diǎn)，而這些跨膜蛋白表達(dá)及激活本身也可能存在一定相關(guān)性。此外，鑒于目前胃癌患者預(yù)后欠佳的現(xiàn)狀，在這些患者中尋找有效的預(yù)測及預(yù)后分子標(biāo)記物顯得十分重要。多項(xiàng)研究采用不同檢測方法探索了這些蛋白在評價(jià)及預(yù)測患者預(yù)后中的意義，但獲得的結(jié)論并不一致。鑒于此，我們啟動(dòng)了這項(xiàng)回顧性分析，旨在探

3、索中國人群胃癌患者中MET、HER-2、EGFR及IGF1R蛋白的表達(dá)、激活情況及其預(yù)后意義。
　　 本課題的第一部分主要通過免疫組化的方法對收集到的胃癌組織樣本進(jìn)行MET、HER-2、EGFR及IGF1R受體激酶蛋白表達(dá)以及激活情況的檢測。通過檢測，了解蛋白過表達(dá)及激活情況，闡明表達(dá)的相互關(guān)系，并結(jié)合患者臨床病理學(xué)特征進(jìn)一步分析這些蛋白的表達(dá)特點(diǎn)，這可能幫助挑選出使用針對這些分子進(jìn)行的靶向治療能獲得最大受益的病人。同時(shí)，分析這

4、四條存在相互關(guān)聯(lián)的交叉通路中膜受體蛋白MET、HER-2、EGFR、IGF1R的共表達(dá)情況，可為未來開展針對不同靶點(diǎn)的藥物聯(lián)合應(yīng)用提供依據(jù)。在本課題第二部分中，我們對第一部分研究中接受胃癌根治切除手術(shù)的患者進(jìn)行生存資料的采集及隨訪，結(jié)合生存分析，探索作為各條通路中重要靶點(diǎn)的這四個(gè)膜受體蛋白的過表達(dá)、激活及共同表達(dá)的預(yù)后意義，尋找可能的預(yù)后因子，為胃癌的個(gè)體化治療提供臨床依據(jù)。
　　 第一部分
　　 中國人群胃癌樣本中ME

5、T、HER-2、EGFR及IGF1R的表達(dá)及激活情況
　　 目的：在中國人群胃癌樣本中檢測MET、HER2、EGFR及IGF1R這四種蛋白的表達(dá)及激活情況，分析這些蛋白的表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系，探索蛋白表達(dá)間的相關(guān)性及共表達(dá)情況。
　　 方法：回顧性分析了2007年9月至2010年2月在復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院接受胃癌切除手術(shù)的患者155例。被切除后冰凍保存的新鮮腫瘤組織經(jīng)福爾馬林固定石蠟包埋后構(gòu)建組織芯片，采用免疫組化

6、的方法檢測切片中MET、HER2、EGFR、IGF1R及P-MET、p-HER2、p-EGFR及p-IGF1R的表達(dá)情況，并分析各蛋白表達(dá)與患者臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性，各蛋白間表達(dá)相關(guān)性及共表達(dá)情況。免疫組化評分0-1定義為陰性，2-3定義為陽性。
　　 結(jié)果：在可評價(jià)的135例胃癌樣本中，MET陽性率為18.5％(25/135)，在分化程度較高(P=0.047)、腸型(P=0.049)、淋巴結(jié)受累程度較低(P=0.037)的腫

7、瘤中陽性率較高。P-MET陽性率為9.6％(13/135)，表達(dá)與各臨床病理學(xué)特征無關(guān)。HER2陽性率為9.6％(13/135)，在賁門部腫瘤(P=0.037)、分化程度較高(P=0.001)的腫瘤中陽性率高。p-HER2陽性率為7.4％(10/135)，在淋巴結(jié)浸潤程度較低(P=0.029)的腫瘤中陽性率較高。EGFR陽性率為26.7％(36/135)，在年齡較小(P=0.022)、分期較早(P=0.015)的患者中表達(dá)增加。p-EC

8、FR陽性率為4.4％(6/135)，表達(dá)與各臨床病理學(xué)特征無關(guān)。IGF1R陽性率為40.3％(56/135)，表達(dá)男性患者(P=0.030)、腸型(P=0.005)、神經(jīng)未受累(P=0.008)、淋巴結(jié)受累程度較低(P＝0.035)的腫瘤中表達(dá)增加。P-IGF1R陽性率為19.3％(26/135)，在神經(jīng)未受累者中表達(dá)增加(P＝0.041)。MET、HER－2、EGFR及IGF1R的過表達(dá)與其激活狀態(tài)(MET與p-MET、HER-2與p

9、-HER2、EGFR與p-EGFR、IGF1R與p-IGF1R)均呈顯著正相關(guān)(P值均<0.01)。MET與HER2共表達(dá)率為5.9％(8/135)，MET與EGFR共表達(dá)率為9.6％(13/135)，MET與IGF1R共表達(dá)率為11.9％(16/135)，HER2與IGF1R共表達(dá)率為6.7％(9/135)，EGFR與IGF1R共表達(dá)率17.8％(24/135)，以上共表達(dá)的蛋白相關(guān)性顯著；EGFR與HER2共表達(dá)率為4.4％(6/1

10、35)，表達(dá)無相關(guān)性。
　　 結(jié)論：MET、HER2、EGFR及IGF1R在中國人群胃癌樣本中的表達(dá)及激活狀態(tài)具有不同的組織學(xué)相關(guān)性，呈現(xiàn)出蛋白各自的表達(dá)特點(diǎn)。MET、HER2、EGFR及IGF1R蛋白表達(dá)間存在一定的相互關(guān)聯(lián)，其中EGFR與IGF1R蛋白、MET與HER2蛋白相關(guān)性最強(qiáng)而HER2與EGFR表達(dá)無關(guān)。EGFR與IGF1R共表達(dá)率最高，HER2與EGFR的共表達(dá)率最低。這些信息可為多靶點(diǎn)聯(lián)合治療的應(yīng)用提供臨床依據(jù)。

11、
　　 第二部分
　　 MET、HER2、EGFR及IGF1R的表達(dá)及激活在中國人群胃癌患者中的預(yù)后價(jià)值研究
　　 目的：探索MET、HER、EGFR、IGF1R蛋白過表達(dá)及激活對于胃癌根治術(shù)后患者復(fù)發(fā)及生存的預(yù)測價(jià)值。
　　 方法：回顧性分析了2007年9月至2010年2月在復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院接受根治性胃癌切除手術(shù)的患者141例，經(jīng)過中位35.1個(gè)月的隨訪，總結(jié)患者的3年無病生存率及3年總生存率。利用

12、第一部分中免疫組化染色的結(jié)果，分析MET、HER2、EGFR、IGF1R及p-MET、p-HER2、p-EGFR及p-IGF1R在這部分接受根治手術(shù)的患者腫瘤組織中的表達(dá)情況。應(yīng)用單因素及多因素分析評價(jià)這些蛋白的過表達(dá)及激活對預(yù)后的影響。
　　 結(jié)果：所有患者3年DFS率為61.0％(86/141)，3年OS率為68.1％(96/141)。在對141例樣本進(jìn)行MET、HER2、EGFR及IGF1R表達(dá)及激活檢測后獲得其中126例

13、可評價(jià)結(jié)果。多因素分析顯示，p-MET陽性(HR=2.47，95％CI[1.04-5.87]；P=0.04)、淋巴結(jié)較多受累(HR=2.71，95％CI[1.34-5.48]；P=0.005)是患者3年無病生存率的獨(dú)立不良預(yù)后因素。淋巴結(jié)較多受累(HR=2.35，95％CI[1.075-5.133]；P=0.032)是患者3年總生存率的獨(dú)立不良預(yù)后因素。MET及HER2共表達(dá)率為5.6％(7/126)，這部分患者的3年DFS率及3年OS

14、率顯著低于非共表達(dá)患者(3年DFS％：28.6％vs.62.1％；P=0.005，3年OS％：42.9％vs。69.7％；P=0.040)。亞組分析顯示，局限期(Ⅰ-Ⅱ期)患者p-MET、HER2是否陽性顯著影響了患者的DFS(p-MET：P=0.011；HER2：P<0.001)，同樣顯著影響了患者OS(p-MET：P=0.002；HER2：P<0.001)；在Ⅲ期患者中，MET陽性是影響DFS的不良因素(P=0.025)。