中國人群胃癌樣本中MET、HER-2、EGFR及TGF1R蛋白的表達及激活調(diào)節(jié)研究.pdf

1、背景：盡管10年來全球范圍內(nèi)胃癌的發(fā)病率持續(xù)下降，其仍然是引起死亡的主要腫瘤之一。早期診斷率的提高顯著增加了手術根治病人的數(shù)量，但胃癌復發(fā)率高，晚期胃癌患者預后差。近年來隨著生物靶向藥物的不斷發(fā)展，其在胃癌治療中的應用也得到越來越多的關注。
　　 MET、HER-2、EGFR及IGF1R是位于胃癌細胞表面由原癌基因編碼的對下游信號激活有重要意義的受體酪氨酸激酶(RTKs)。由于這些蛋白的過表達或激活可通過多種方式激發(fā)下游的信號級

2、聯(lián)反應，引起腫瘤細胞一系列生物學行為的改變，它們已成為胃癌領域有重要意義的藥物靶點。既往研究證實，MET、HER2、EGFR及IGF1R介導的信號通路間存在交叉位點，而這些跨膜蛋白表達及激活本身也可能存在一定相關性。此外，鑒于目前胃癌患者預后欠佳的現(xiàn)狀，在這些患者中尋找有效的預測及預后分子標記物顯得十分重要。多項研究采用不同檢測方法探索了這些蛋白在評價及預測患者預后中的意義，但獲得的結論并不一致。鑒于此，我們啟動了這項回顧性分析，旨在探

3、索中國人群胃癌患者中MET、HER-2、EGFR及IGF1R蛋白的表達、激活情況及其預后意義。
　　 本課題的第一部分主要通過免疫組化的方法對收集到的胃癌組織樣本進行MET、HER-2、EGFR及IGF1R受體激酶蛋白表達以及激活情況的檢測。通過檢測，了解蛋白過表達及激活情況，闡明表達的相互關系，并結合患者臨床病理學特征進一步分析這些蛋白的表達特點，這可能幫助挑選出使用針對這些分子進行的靶向治療能獲得最大受益的病人。同時，分析這

4、四條存在相互關聯(lián)的交叉通路中膜受體蛋白MET、HER-2、EGFR、IGF1R的共表達情況，可為未來開展針對不同靶點的藥物聯(lián)合應用提供依據(jù)。在本課題第二部分中，我們對第一部分研究中接受胃癌根治切除手術的患者進行生存資料的采集及隨訪，結合生存分析，探索作為各條通路中重要靶點的這四個膜受體蛋白的過表達、激活及共同表達的預后意義，尋找可能的預后因子，為胃癌的個體化治療提供臨床依據(jù)。
　　 第一部分
　　 中國人群胃癌樣本中ME

5、T、HER-2、EGFR及IGF1R的表達及激活情況
　　 目的：在中國人群胃癌樣本中檢測MET、HER2、EGFR及IGF1R這四種蛋白的表達及激活情況，分析這些蛋白的表達與臨床病理學特征的關系，探索蛋白表達間的相關性及共表達情況。
　　 方法：回顧性分析了2007年9月至2010年2月在復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院接受胃癌切除手術的患者155例。被切除后冰凍保存的新鮮腫瘤組織經(jīng)福爾馬林固定石蠟包埋后構建組織芯片，采用免疫組化

6、的方法檢測切片中MET、HER2、EGFR、IGF1R及P-MET、p-HER2、p-EGFR及p-IGF1R的表達情況，并分析各蛋白表達與患者臨床病理學特征的相關性，各蛋白間表達相關性及共表達情況。免疫組化評分0-1定義為陰性，2-3定義為陽性。
　　 結果：在可評價的135例胃癌樣本中，MET陽性率為18.5％(25/135)，在分化程度較高(P=0.047)、腸型(P=0.049)、淋巴結受累程度較低(P=0.037)的腫

7、瘤中陽性率較高。P-MET陽性率為9.6％(13/135)，表達與各臨床病理學特征無關。HER2陽性率為9.6％(13/135)，在賁門部腫瘤(P=0.037)、分化程度較高(P=0.001)的腫瘤中陽性率高。p-HER2陽性率為7.4％(10/135)，在淋巴結浸潤程度較低(P=0.029)的腫瘤中陽性率較高。EGFR陽性率為26.7％(36/135)，在年齡較小(P=0.022)、分期較早(P=0.015)的患者中表達增加。p-EC

8、FR陽性率為4.4％(6/135)，表達與各臨床病理學特征無關。IGF1R陽性率為40.3％(56/135)，表達男性患者(P=0.030)、腸型(P=0.005)、神經(jīng)未受累(P=0.008)、淋巴結受累程度較低(P＝0.035)的腫瘤中表達增加。P-IGF1R陽性率為19.3％(26/135)，在神經(jīng)未受累者中表達增加(P＝0.041)。MET、HER－2、EGFR及IGF1R的過表達與其激活狀態(tài)(MET與p-MET、HER-2與p

9、-HER2、EGFR與p-EGFR、IGF1R與p-IGF1R)均呈顯著正相關(P值均<0.01)。MET與HER2共表達率為5.9％(8/135)，MET與EGFR共表達率為9.6％(13/135)，MET與IGF1R共表達率為11.9％(16/135)，HER2與IGF1R共表達率為6.7％(9/135)，EGFR與IGF1R共表達率17.8％(24/135)，以上共表達的蛋白相關性顯著；EGFR與HER2共表達率為4.4％(6/1

10、35)，表達無相關性。
　　 結論：MET、HER2、EGFR及IGF1R在中國人群胃癌樣本中的表達及激活狀態(tài)具有不同的組織學相關性，呈現(xiàn)出蛋白各自的表達特點。MET、HER2、EGFR及IGF1R蛋白表達間存在一定的相互關聯(lián)，其中EGFR與IGF1R蛋白、MET與HER2蛋白相關性最強而HER2與EGFR表達無關。EGFR與IGF1R共表達率最高，HER2與EGFR的共表達率最低。這些信息可為多靶點聯(lián)合治療的應用提供臨床依據(jù)。

11、
　　 第二部分
　　 MET、HER2、EGFR及IGF1R的表達及激活在中國人群胃癌患者中的預后價值研究
　　 目的：探索MET、HER、EGFR、IGF1R蛋白過表達及激活對于胃癌根治術后患者復發(fā)及生存的預測價值。
　　 方法：回顧性分析了2007年9月至2010年2月在復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院接受根治性胃癌切除手術的患者141例，經(jīng)過中位35.1個月的隨訪，總結患者的3年無病生存率及3年總生存率。利用

12、第一部分中免疫組化染色的結果，分析MET、HER2、EGFR、IGF1R及p-MET、p-HER2、p-EGFR及p-IGF1R在這部分接受根治手術的患者腫瘤組織中的表達情況。應用單因素及多因素分析評價這些蛋白的過表達及激活對預后的影響。
　　 結果：所有患者3年DFS率為61.0％(86/141)，3年OS率為68.1％(96/141)。在對141例樣本進行MET、HER2、EGFR及IGF1R表達及激活檢測后獲得其中126例

13、可評價結果。多因素分析顯示，p-MET陽性(HR=2.47，95％CI[1.04-5.87]；P=0.04)、淋巴結較多受累(HR=2.71，95％CI[1.34-5.48]；P=0.005)是患者3年無病生存率的獨立不良預后因素。淋巴結較多受累(HR=2.35，95％CI[1.075-5.133]；P=0.032)是患者3年總生存率的獨立不良預后因素。MET及HER2共表達率為5.6％(7/126)，這部分患者的3年DFS率及3年OS

14、率顯著低于非共表達患者(3年DFS％：28.6％vs.62.1％；P=0.005，3年OS％：42.9％vs。69.7％；P=0.040)。亞組分析顯示，局限期(Ⅰ-Ⅱ期)患者p-MET、HER2是否陽性顯著影響了患者的DFS(p-MET：P=0.011；HER2：P<0.001)，同樣顯著影響了患者OS(p-MET：P=0.002；HER2：P<0.001)；在Ⅲ期患者中，MET陽性是影響DFS的不良因素(P=0.025)。