低分子量玉米功能肽的分離純化及其生理活性的研究.pdf

1、活性氧是微生物細(xì)胞在正常代謝過程中產(chǎn)生的一類化學(xué)性質(zhì)極其活潑的基團(tuán)分子，主要包括超氧自由基(O2)、過氧化氫(H2O2)和羥基自由基(OH·)。自由基是游離存在的、帶有不成對(duì)電子的分子、原子或離子，其化學(xué)性質(zhì)很活潑。在生物體內(nèi)它們雖然不斷在產(chǎn)生，但也不斷地被清除。在生理?xiàng)l件下，處于平衡狀態(tài)的自由基濃度是極低的。它們不僅不會(huì)損傷機(jī)體，而且還可顯示其獨(dú)特的生理作用。在病理情況下，環(huán)境物理因素或外源性化學(xué)物質(zhì)直接或間接誘導(dǎo)產(chǎn)生的自由基得不到及

2、時(shí)清除，或者內(nèi)源性自由基的產(chǎn)生和清除失去了正常平衡，常常會(huì)造成自由基對(duì)機(jī)體的損傷。有大量事實(shí)表明，多種疾病都與氧自由基及其衍生物有關(guān)系。在癌癥的發(fā)生和發(fā)展中，每個(gè)階段都有自由基的產(chǎn)生和參與，另外在癌的治療過程中也都有自由基的參與，因此可以說自由基和癌關(guān)系極為密切；有研究表明，自由基對(duì)細(xì)胞凋亡也有一定的影響，認(rèn)為活性氧自由基可能就是細(xì)胞程序性死亡的介質(zhì)或傳遞器。另外氧自由基還能夠引起糖尿病、自身免疫疾病等其它疾病。正是由于自由基對(duì)機(jī)體的毒

3、害作用，使得清除氧自由基及其衍生物就變得十分必要。因此，抗氧化劑的篩選和研究就變的十分重要。 近年來，生物活性肽的研究日益受到人們的重視，人們以動(dòng)物、植物、微生物等通過酶解等物理化學(xué)方法分離制備出各種生物活性肽，生物活性肽與傳統(tǒng)藥物相比，具有易吸收，抗原性小，口感好等優(yōu)點(diǎn)。 我國的玉米加工生產(chǎn)還處于粗放型生產(chǎn)狀態(tài)，主要集中在玉米淀粉、飼料、玉米蛋白粉等一些初級(jí)產(chǎn)品上，產(chǎn)值低，設(shè)備簡(jiǎn)單，工藝落后，科技含量不夠。為了促進(jìn)玉米

4、深加工，進(jìn)一步提高玉米產(chǎn)品的附加值，延長(zhǎng)玉米深加工產(chǎn)業(yè)鏈和實(shí)現(xiàn)玉米的高附加值轉(zhuǎn)化，本文在玉米肽的制備、分離、純化和生理活性等方面開展了以下研究： 1、本文以玉米加工生產(chǎn)玉米淀粉的副產(chǎn)物玉米蛋白粉(俗稱黃粉子)為原料，首先從玉米蛋白粉中提取醇溶蛋白，然后以醇溶蛋白為底物，采用一種堿性蛋白酶，在50℃、pH為8.0時(shí)進(jìn)行酶解，酶解產(chǎn)物再經(jīng)過一系列的分離純化，真空冷凍干燥后得到淡黃色粉狀物-玉米肽。 2、研究了玉米肽的抗氧化作

5、用，這種從植物蛋白中分離出來的生物活性小肽在不同檢測(cè)系統(tǒng)均可表現(xiàn)不同程度的抗氧化功能及抗氧化能力，濃度為10mg/ml時(shí)，其清除率達(dá)到74.36％，有明顯的清除DPPH的作用。玉米肽可做為一種廣泛的抗氧化劑。 3、研究了玉米肽對(duì)ACE的抑制作用，其中當(dāng)玉米肽的濃度為20mg/ml的時(shí)候，玉米肽對(duì)ACE的抑制率就高于40％，隨玉米肽濃度的增大，對(duì)ACE的抑制率也逐漸增大。當(dāng)玉米肽濃度達(dá)到100mg/ml的時(shí)候，對(duì)ACE的抑制率超過

6、80％。從本試驗(yàn)可以看出，玉米肽以及它的分離純化產(chǎn)物可以通過抑制ACE的活性來達(dá)到降血壓的目的。 4、采用MTT法研究了不同濃度的玉米肽對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖及粘附纖維粘連蛋白(Fibronectin，F(xiàn)N)能力的影響；采用細(xì)胞劃痕法研究玉米肽對(duì)MCF-7細(xì)胞在FN遷移能力的影響。 綜上所述，本試驗(yàn)不僅制備了具有廣泛應(yīng)用的玉米肽，而且也證實(shí)了玉米肽具有抗高血壓的作用和對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖、MCF-7細(xì)胞在FN上粘附以及MC