淋巴瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞通過Legumain修飾細(xì)胞外基質(zhì)促進腫瘤進展.pdf

1、彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)是一種異質(zhì)性很高、難以治療并易于復(fù)發(fā)的腫瘤。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)對腫瘤進展的促進作用已被眾多的臨床統(tǒng)計資料和實驗結(jié)果證明。然而，淋巴瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(LAMs)在彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中的作用還不清楚，而腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞促腫瘤進展的機制也不完全清楚。
　　 研究發(fā)現(xiàn)DLBCL微環(huán)境中的LAMs過表達(dá)一種天冬酰胺內(nèi)肽酶Legumain。為了研究LAMs是否通過Legumain在DLBCL的進展

2、中起到重要作用，我們收集了治療前DLBCL病人的組織標(biāo)本并且構(gòu)建了人DLBCL細(xì)胞系OCI-Ly3在NOD/SCID鼠中的移植瘤模型(皮下成瘤)。對治療前DLBCL病人石蠟組織切片染色，計算CD163陽性的巨噬細(xì)胞占全部細(xì)胞的比例。免疫熒光共染Legumain和CD163(鼠體系使用CD206)證實LAMs高表達(dá)Legumain。我們分別檢測了小鼠移植瘤模型早期和晚期組織中的纖維化水平和Ⅱ型LAMs占全部浸潤巨噬細(xì)胞細(xì)胞的比例。收集含有

3、Legumain的細(xì)胞上清液，檢測抗體活化的Legumain對粘連蛋白和Ⅰ型膠原的降解情況。另外，我們使用體外成管實驗的方法檢測了具有活性的Legumain對血管新生的作用。最后，我們通過尾靜脈注射脂質(zhì)體包被的氯膦酸鹽清除鼠移植瘤模型中的LAMs；使用Legumain抑制劑來封閉鼠移植瘤模型中Legumain的活性，記錄各組小鼠腫瘤生長情況并收集淋巴瘤標(biāo)本。
　　 本研究結(jié)果表明，不同DLBCL病人Ⅱ型LAMs占全部細(xì)胞的比例是