小檗堿對(duì)壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)大鼠心肌肥厚的作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景：心肌肥厚常發(fā)生于高血壓、心臟瓣膜疾病等壓力負(fù)荷過(guò)度性疾病，是決定多種心血管疾病預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因子。長(zhǎng)期壓力負(fù)荷刺激將導(dǎo)致失代償性心肌肥厚、心力衰竭、惡性心律失?；蛐脑葱遭?。自噬是一種進(jìn)化上高度保守的細(xì)胞內(nèi)分解代謝的過(guò)程，自噬增強(qiáng)是對(duì)長(zhǎng)期壓力后負(fù)荷刺激的一種適應(yīng)性反應(yīng)。傳統(tǒng)中藥小檗堿具有心肌保護(hù)作用，且在多種細(xì)胞上表現(xiàn)出自噬增強(qiáng)的作用，但其心血管保護(hù)作用和自噬增強(qiáng)是否相關(guān)并不清楚。
　　目的：利用主動(dòng)脈縮窄手術(shù)(TAC)建立

2、壓力超負(fù)荷所致的心肌肥厚大鼠模型，探索中藥小檗堿抗心肌肥厚的作用以及具體分子機(jī)制。方法:選取體重約200g左右的SD大鼠，分為假手術(shù)組(Sham+Vehicle)、主動(dòng)脈縮窄組(TAC+Vehicle)、小檗堿治療組(TAC+Berberine)以及小檗堿+3-甲基腺嘌呤治療組（TAC+Berberine+3-MA）。TAC術(shù)后即刻給予小檗堿10mg/kg每日一次，灌胃給藥;3-甲基腺嘌呤100mg/kg，每?jī)扇找淮?，腹腔注射給藥。術(shù)后

3、4周行超聲檢測(cè)大鼠心功能的變化;H&E染色、Masson染色和TUNEL染色觀察心肌細(xì)胞大小變化，纖維化程度以及細(xì)胞凋亡情況;RT-qPCR方法檢測(cè)心肌肥厚標(biāo)記物的表達(dá)情況;透射電鏡檢測(cè)心臟組織的結(jié)構(gòu)變化和自噬小體;Western blotting和免疫組化檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白、自噬相關(guān)蛋白和信號(hào)通路的變化情況。
　　結(jié)果：TAC手術(shù)可以明顯增加大鼠心肌肥厚、心臟重量與體重比、心肌細(xì)胞凋亡、心臟纖維化以及心肌肥厚分子標(biāo)記物腦利鈉

4、肽(BNP，brainnatriuretic peptide)的表達(dá)，小檗堿可明顯改善壓力負(fù)荷所致的上述心臟的改變。在小檗堿顯著改善大鼠心臟肥厚、心肌細(xì)胞凋亡以及心功能減退的同時(shí)，也可明顯增強(qiáng)大鼠心肌組織的自噬作用。進(jìn)一步將小檗堿與自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤合用可阻止小檗堿所致的自噬水平的增加，從而消除了小檗堿的抗心肌肥厚、抑制心肌細(xì)胞凋亡以及改善心功能紊亂的作用。此外，小檗堿可顯著改善TAC所致的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的增加，且小檗的這種降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)