苦參堿對慢性心力衰竭大鼠心室重構的干預作用及其分子機制研究.pdf

1、第一部分:苦參堿對慢性心力衰竭大鼠心室重構的干預作用
　　目的:研究苦參堿對異丙腎上腺素(isoproterenol，ISO)致慢性心力衰竭模型大鼠心室重構及心功能衰竭的干預作用。
　　方法:Sprague-Dawley大鼠皮下注射異丙腎上腺素（ISO，5mg/kg/d，連續(xù)7天）建立大鼠慢性心衰模型，同時觀察苦參堿（25、50和100mg/kg，每天1次，連續(xù)7天）給藥對模型大鼠體重、心肌肥厚指數(shù)、心肌損傷標志酶、心肌組織

2、形態(tài)學結構、心率、血壓、左心室收縮壓（LVSP）、左心室終末舒張壓（LVEDP）、左心室內壓最大上升速率（LVdP/dtmax）以及左心室內壓最大下降速率（LVdP/dtmin）的影響。
　　結果:大鼠體重在各實驗組之間無顯著性變化（allP＞0.05）。與正常對照組相比，模型組大鼠心肌肥厚指數(shù)和血清心肌損傷標志酶顯著性增加，提示模型組大鼠具有顯著性心肌肥厚并伴隨心肌細胞壞死或凋亡；組織病理學顯示模型組大鼠心肌細胞直徑（CD）和橫

3、截面積（CSA）以及間質膠原纖維含量顯著增加，表明大鼠心肌細胞和心肌成纖維細胞顯著性肥大或增殖，心室發(fā)生重構。另外可見模型組大鼠可見心功能顯著低下，表現(xiàn)為LVSP和LVdP/dtmax顯著降低和LVEDP和LVdP/dtmin顯著升高（P＜0.01），表明模型組大鼠發(fā)生心力衰竭；同時收縮壓和心率顯著降低（P＜0.05），但是舒張壓組間無差別?？鄥A(25、50和100mg/kg/d，7天)給藥后顯著降低了心肌肥厚指數(shù)（全心濕質量/體質量

4、比、左心室濕質量/體質量比）和血清心肌損傷標志酶：乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的含量和心肌肌鈣蛋白（cTn-I）的含量；組織病理學結果顯示，苦參堿可顯著減輕大鼠肥厚性心肌組織病理結構的異常改變即抑制心肌細胞肥大和間質心肌纖維化；另外同時顯著改善了大鼠左心室收縮功能（升高LVSP和LVdP/dtmax）、舒張功能（降低LVEDP和LVdP/dtmin）以及收縮壓和心率。
　　結論:苦參堿對ISO致大鼠心力衰竭模型心室重構及

5、心功能衰竭具有保護作用。
　　第二部分:苦參堿關于預防慢性心衰大鼠心室重構的分子機制研究
　　目的:研究ISO致SD大鼠慢性心力衰竭模型心室重構組織中PI3Kγ/Akt/GSK-3β信號轉導通路、PRMT1/ADMA/DDAH2系統(tǒng)、ODC/SSAT系統(tǒng)的蛋白表達，以期在眾多信號通路中為苦參堿抗大鼠心室重構篩選出其可能作用的藥物靶點。
　　方法:分別用ELISA方法和生物化學法檢測血清ADMA和NO的含量，并用West

6、ernblot方法測定大鼠心室PI3Kγ、Akt、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、GSK-3β、p-GSK-3β(Ser9)、iNOS、eNOS、p-eNOS(Ser1177)、PRMT1、DDAH2、ODC、SSAT等蛋白的表達。
　　結果:與正常對照組相比，ISO組大鼠血清NO水平顯著性降低，而ADMA血清水平顯著性升高；心肌組織內PI3Kγ、Akt、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308

7、)、p-GSK-3β(Ser9)、iNOS、PRMT1、ODC、SSAT蛋白含量顯著性提高，而GSK-3β、eNOS、p-eNOS(Ser1177)、DDAH2含量顯著性降低?？鄥A（25、50和100mg/kg）給藥后可下調模型大鼠心肌組織PI3Kγ、Akt、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、p-GSK-3β(Ser9)、iNOS、ODC蛋白的表達，同時可上調GSK-3β、eNOS、p-eNOS(Ser1177)