石家莊市社區(qū)居民APOAI、MnSOD基因多態(tài)性與血生化指標(biāo)的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:隨著人口的老齡化,阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患病率逐年增加。AD已成為常見的老年人神經(jīng)退行性疾病。在臨床上,該病一旦診斷即處于疾病中晚期,治療迄今尚無特效藥物。因此對該病的早期診斷和早期干預(yù)已成為AD研究的熱點(diǎn)之一。與AD發(fā)病相關(guān)基因多態(tài)性的研究一直是研究的重點(diǎn)領(lǐng)域。載脂蛋白AI(apolipoprotein A-I,APOAI),錳超氧化物歧化酶(manganese superoxide dis

2、mutase,MnSOD)基因即屬于熱點(diǎn)研究基因之列。
　　 APOAI是高密度脂蛋白的主要組分,在體內(nèi)是一種重要的載脂蛋白。它能選擇性的促進(jìn)脂質(zhì)的攝取和膽固醇的外流,并參與膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn),對人體膽固醇的代謝具有很重要的作用。它主要合成于肝臟和小腸,在腦血管內(nèi)皮中也有表達(dá)。有文獻(xiàn)報道.APOAI-75bp多態(tài)性位點(diǎn)A等位基因攜帶者患早發(fā)性阿爾茨海默病(EOAD)的危險性顯著增加。研究表明高膽固醇血癥是AD的一個重要的危險因素。

3、有研究還表明高膽固醇膳食增加Ap的積累,加速AD相關(guān)病理變化。而APOAI基因多態(tài)性與血漿膽固醇水平相關(guān)聯(lián)。
　　 MnSOD存在于線粒體內(nèi),是人體必需的超氧化物歧化酶。它是清除體內(nèi)超氧自由基的特異酶。同時它還具有抗炎,抗腫瘤,抗輻射等作用。研究表明自由基誘導(dǎo)的的細(xì)胞損傷是AD的發(fā)病機(jī)制之一。
　　 本實(shí)驗(yàn)以石家莊市社區(qū)內(nèi)居住的普通中老年志愿者為研究對象。通過抽取志愿者外周靜脈血進(jìn)行白細(xì)胞基因組DNA提取和血清生化指標(biāo)測

4、定。參照文獻(xiàn)進(jìn)行APOAI、MnSOD基因擴(kuò)增及酶切分型。結(jié)合一般情況調(diào)查、簡短精神狀態(tài)(MMSE)評分和中醫(yī)體質(zhì)分型辯證,綜合研究探討基因型和血生化指標(biāo)及MMSE分值之間的相關(guān)性。為早期預(yù)測和評估AD的風(fēng)險因素提供線索。
　　 方法:對志愿者進(jìn)行實(shí)驗(yàn)相關(guān)的測試后,抽取外周靜脈血,進(jìn)行血中白細(xì)胞基因組DNA提取和血清生化指標(biāo)測定?；蚪MDNA的提取方法采用酚氯仿異戊醇法,用聚合酶鏈反應(yīng)和限制性片段長度多態(tài)性方法(PCR-RFLP

5、法)對MnSOD、APOAI基因進(jìn)行擴(kuò)增和酶切分型。數(shù)據(jù)處理應(yīng)用統(tǒng)計軟件SAS V8進(jìn)行分析。非參數(shù)檢驗(yàn)方法對血生化指標(biāo)、基因分型及等位基因統(tǒng)計分析;以P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.MnSOD基因
　　 擴(kuò)增酶切成功167例,基因型分布經(jīng)卡方檢驗(yàn)符合Hardy-Weinberg平衡?；蛐团c血生化指標(biāo)及MMSE的相關(guān)性經(jīng)檢驗(yàn)得出:男性,TG濃度水平:AA型基因攜帶者比AV型攜帶者高(P=0

6、.006＜0.05),A等位基因比V等位基因高(P=0.004＜0.05)。男性,VLDL-Ch濃度水平:AA型基因攜帶者比AV型基因攜帶者高(P=0.019＜0.05),A等位基因比V等位基因高(P=0.028＜0.05)。男性＜60歲組,TG濃度:AA型基因攜帶者比AV型基因攜帶者高(P=0.006＜0.05),A等位基因攜帶者比V等位基因攜帶者高(P=0.017＜0.05)。男性＜60歲組,VLDL-Ch濃度:A等位基因攜帶者比V

7、等位基因攜帶者高(P=0.022＜0.05)。
　　 2.APOAI-75bp基因
　　 基因擴(kuò)增酶切成功179例,基因型分布經(jīng)卡方檢驗(yàn)符合Hardy-Weinberg平衡?；蛐团c血生化指標(biāo)及MMSE分值的相關(guān)性經(jīng)檢驗(yàn)得出:女性,MMSE分值:GG型基因攜帶者比AA型攜帶者高(P=0.044＜0.05)。女性≥60歲組,MMSE分值:G等位基因攜帶者比A等位基因者高(P=0.046＜0.05)。女性≥60歲組,G濃度:

8、G等位基因攜帶者比A等位基因者高(P=0.011＜0.05)。
　　 3.APOAI+83bp基因
　　 基因擴(kuò)增酶切成功179例,基因型分布經(jīng)卡方,Fisher確切概率法檢驗(yàn)符合Hardy-Weinberg平衡。基因型與血生化指標(biāo)及MMSE分支的相關(guān)性經(jīng)檢驗(yàn)得出:全年齡全性別,TG濃度:TC基因攜帶者比CC基因攜帶者高(P=0.039＜0.05)。全年齡全性別,G濃度:TC基因攜帶者比CC基因攜帶者高(P=0.037＜

9、0.05)。全年齡全性別,VLDL-Ch濃度:TC基因攜帶者比CC基因攜帶者高(P=0.013＜0.05)。女性,TCh濃度:CC型攜帶者比TC型攜帶者高(P=0.029＜0.05)。女性,MMSE分值:TC型基因攜帶者比CC型基因攜帶者高(P=0.04＜0.05)。女性,MMSE分值:T等位基因攜帶者比A等位基因攜帶者高(P=0.046＜0.05)。女性＜60歲組,TG濃度:TC型基因攜帶者比CC型攜帶者高(P=0.035＜0.05)

10、。女性＜60歲組,TG濃度:T等位基因攜帶者比C等位基因攜帶者高(P=0.042＜0.05)。女性≥60歲組,TCh濃度:CC型基因攜帶者比TC型基因攜帶者高(P=0.005＜0.05)。女性＞t60歲組,HDL-Ch濃度:CC型基因攜帶者比TC型基因攜帶者高(P=0.029＜0.05)。女性≥60歲組,TCh濃度:C等位基因攜帶者比T等位基因攜帶者高(P=0.006＜0.05)。女性≥60歲組,HDL-Ch濃度:C等位基因攜帶者比T等

11、位基因攜帶者高(P=0.033＜0.05)。女性≥60歲組,MMSE分值:CC型基因攜帶者的中位數(shù)和四分位間距分別為:27分、3.00,TC型基因攜帶者的中位數(shù)和四分位間距分別為:29分、2.00;兩基因型比較:P=0.063。
　　 4.中醫(yī)分型與血生化指標(biāo)
　　 TCh濃度:陰性體質(zhì)者比陽性體質(zhì)者高(P=O.006＜0.05)。
　　 TG濃度:陽性性體質(zhì)比陰性體質(zhì)者高(P=0.046＜0.05)。