大鼠類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕⑴c評(píng)價(jià).pdf

1、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎、破壞性關(guān)節(jié)病變?yōu)橹饕卣鞯穆?、進(jìn)行性、侵襲性自身免疫性疾病，致畸、致殘率極高且大多數(shù)患者有反復(fù)發(fā)作的病程，雖然與RA發(fā)病相關(guān)的因素己經(jīng)清楚，其中，多種免疫活性細(xì)胞的活化，細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)的共同參與，血管翳的形成等是造成該病發(fā)生、發(fā)展的重要原因。但是RA的具體發(fā)病機(jī)理至今不明，尚待進(jìn)一步研究。目前，改善臨床癥狀的抗風(fēng)濕藥是治療RA的主要手段，由于傳統(tǒng)抗

2、風(fēng)濕藥的毒副作用較大，而生物制劑價(jià)格昂貴，因而患者長期服用依從性差，不利于疾病控制。因此研制開發(fā)有效、毒副作用小的抗風(fēng)濕藥物勢在必行。而研究并建立合理有效的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型是研制開發(fā)有效治療藥物和制訂有效治療措施的關(guān)鍵。
　　 本研究以Wistar大鼠為試驗(yàn)動(dòng)物，用不同的實(shí)驗(yàn)試劑對(duì)大鼠進(jìn)行免疫，從關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)定、血清學(xué)檢測、病理學(xué)檢測和影像學(xué)檢測等方面對(duì)模型進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。方法是：將4～6周齡雌性Wistar大鼠隨機(jī)分成五組

3、：M1組（CFA足跖部皮下注射法免疫）、M2組（雞CII+CFA乳化劑足跖部、尾根部、背部三點(diǎn)注射法免疫）、M3組（雞CII+CFA乳化劑+冰浴7d）、M4組（雞CII蛋白免疫）、對(duì)照組（不做任何處理），7d后足跖部皮下注射加強(qiáng)免疫一次。于大鼠首次免疫后7d、14d、21d分別測量各組大鼠的足跖部厚度，并進(jìn)行關(guān)節(jié)炎指數(shù)（AI）評(píng)定；于21d、42d采用雙抗體夾心ELISA法測定各組大鼠血清中抗CII抗體水平、細(xì)胞因子TNF-α、IL-1

4、β和IL-17水平，并于21d和42d分別觀察大鼠的放射學(xué)變化和組織病理學(xué)變化。通過以上幾方面指標(biāo)的檢測綜合評(píng)價(jià)建立的大鼠實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎模型。
　　 研究結(jié)果表明：M1～M3組大鼠在首次免疫10d后不同的測定時(shí)間點(diǎn)AI值和足跖部厚度均顯著高于對(duì)照組和M4組大鼠（P<0.05），炎癥高峰期出現(xiàn)于首次免疫后的19～27d，而M4組與對(duì)照組的大鼠比較不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。M2、M3組大鼠血清中抗CII抗體水平在炎癥高峰期時(shí)極顯著的高于對(duì)照組

5、（P<0.01），而M1組和M4組大鼠血清中抗CII抗體水平則無明顯變化。M1～M3組大鼠在炎癥高峰期時(shí)血清中TNF-α、IL-1β、IL-17水平均顯著高于對(duì)照組大鼠（P<0.05），但高峰期后炎癥水平逐漸有所下降，但42d仍高于正常水平。病理組織切片顯示，M1～M3組大鼠在關(guān)節(jié)滑膜中有大量炎性細(xì)胞浸潤，骨細(xì)胞增生，并形成血管翳。X光片顯示踝關(guān)節(jié)周圍軟組織嚴(yán)重腫脹，踝關(guān)節(jié)、足趾關(guān)節(jié)間隙模糊、狹窄，骨質(zhì)破壞。
　　 通過以上指標(biāo)