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文檔簡介
1、目的:研究急性高眼壓大鼠視網膜的內質網應激反應(endoplasmic reticulum stress,ERS)以及活血化瘀方劑對ERS的影響。
方法:健康成年清潔型Wistar大鼠88只,隨機分為空白對照組(8只),高眼壓組(40只),治療組(40只)。除對照組外所有大鼠均隨機取一眼制作急性高眼壓模型,治療組在造模后給予活血化瘀方劑4ml/d灌胃,高眼壓組和治療組大鼠分別在造模后12h、1d,3d,7d,14d處死。H
2、E染色光鏡下觀察各組視網膜組織的形態(tài)學變化,免疫組織化學方法觀察視網膜GRP78、Thy-1-表達的變化,實時定量RT-PCR方法觀察視網膜GRP78mRNA、Thy-1mRNA的變化。
結果:1.光鏡:高眼壓組造模后12h,視網膜全層水腫,胞核腫脹,視網膜變厚。造模后1d,視網膜水腫達高峰。造模后3d,視網膜水腫減輕,視網膜神經節(jié)細胞(retinalganglial cells,RGCs)數目有所減少,視網膜開始變薄。造
3、模后7d,RGCs排列更加疏松。造模后14d,RGCs數目稀少,視網膜萎縮。治療組較高眼壓組在各時間點的變化趨勢相同,但程度都輕于高眼壓組。2.免疫組織化學:高眼壓組造模后12h,GRP78的表達量較正常對照組迅速上調(P<0.05),造模后1d,GRP78表達量達高峰(P<0.05),造模后3d表達量迅速降低,但仍高于對照組(P<0.05)。治療組GRP78表達量在造模后12h較正常對照組顯著增多(P<0.05);造模后1d達高峰,但
4、增加量少于同時間點高眼壓壓組(P<0.05);造模后3d表達量降低,且低于同時間點高眼壓組(P<0.05)。造模后7d,14d高眼壓組、治療組、對照組間均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。造模后14d,高眼壓組和治療組Thy-1的表達量均降低,但治療組Thy-1表達量明顯高于高眼壓組。3.實時定量RT-PCR:高眼壓組造模后12h,GRP78mRNA水平較正常對照組迅速上調(P<0.05),造模后1d,GRP78mRNA水平達高峰(P<0.
5、05),造模后3d表達量迅速降低,但仍高于對照組(P<0.05)。治療組GRP78mRNA表達量在造模后12h較正常對照組顯著增多(P<0.05);造模后1d達高峰,但增加量少于同時間點加壓組(P<0.05);造模后3d表達量降低,且低于同時間點高眼壓組(P<0.05)。造模后7d,14d高眼壓組、治療組、對照組間均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。造模后14d,高眼壓組和治療組Thy-1mRNA均降低,但治療組Thy-1mRNA水平明顯高
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