川芎對慢性高眼壓大鼠視網膜神經節(jié)細胞凋亡的影響.pdf

1、背景：青光眼是全球第二位致盲眼病，以視網膜神經節(jié)細胞(retinal ganglioncells，RGCs)的進行性死亡為病理基礎。眼壓升高是其主要的危險因素。青光眼視神經保護旨在是延緩或阻止視網膜神經節(jié)細胞的死亡，保護視功能。
　　 目的：建立慢性高眼壓大鼠模型，觀察川芎嗪對慢性高眼壓大鼠視網膜神經節(jié)細胞凋亡的影響及相關凋亡基因bcl-2表達的調節(jié)，探討川芎嗪對慢性高眼壓大鼠視網膜神經節(jié)細胞的保護作用。
　　 方法：健

2、康SD雄性大鼠30只，隨機分為正常組、高眼壓組和川芎嗪治療組，每組10只。采用上鞏膜靜脈燒灼法制作高眼壓模型。用Tono-pen AVVI壓平式眼壓計測量大鼠眼壓。高眼壓組和治療組分別燒灼3條上鞏膜靜脈，正常對照組不做處理。高眼壓持續(xù)7天后川芎嗪治療組給予腹腔注射川芎嗪，正常組和高眼壓組給予等量的生理鹽水。造模4周后取大鼠眼球，行視網膜常規(guī)HE染色、TUNEL原位細胞凋亡檢測和bcl-2免疫組化檢測。采用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件進行數

3、據分析，各組所測數據以均數±標準差(x±s)表示，三組總體比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用LSD-t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果
　　 1、眼壓測量
　　 造模前所有大鼠平均眼壓為13.83±2.11 mmHg。造模后高眼壓組、川芎嗪治療組眼壓均呈中等程度升高，較術前眼壓增加了約40％，且4w以來維持穩(wěn)定。兩組各時間點眼壓，與正常組比較差異均有顯著意義(P<0.05)。而術后高眼壓組

4、、川芎嗪治療組各時間點眼壓比較差異均無顯著意義(P>0.05)。川芎嗪對慢性高眼壓大鼠RGCs的保護作用與眼壓無關。
　　 2、HE染色
　　 正常對照組視網膜各層次排列規(guī)整，視網膜神經節(jié)細胞(RGCs)單層排列，胞核明顯。高眼壓組視網膜萎縮變薄，顏色變淺，內核層和外核層排列疏松，RGCs數量明顯減少，部分細胞出現胞核裂解。川芎嗪治療組視網膜結構層次分明，外核層和內核層細胞排列稍紊亂，RGCs較正常組無明顯改變。形態(tài)學顯

5、示川芎嗪治療組視網膜的損傷程度較高眼壓組明顯減輕。
　　 3、TUNEL凋亡檢測
　　 正常組未見TUNEL細胞陽性細胞染色，高眼壓組可見大量深染的棕黃色TUNEL陽性細胞(9.00±0.89)；川芎嗪組可見少量TUNEL陽性細胞(3.50±1.87)。TUNEL陽性細胞主要位于視網膜神經節(jié)細胞層(GCL)。三組TUNEL陽性細胞平均數總體比較，差異有統(tǒng)計學意義(F=86.16，P<0.05)。高眼壓組TUNEL陽性細胞

6、數與正常對照組比較，差異有顯著意義(P<0.05)；川芎嗪治療組TUNEL陽性細胞數與其他兩組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 4、Bcl-2免疫組化檢測
　　 正常組視網膜中bcl-2可見弱陽性表達(0.375±0.004)，高眼壓組bcl-2陽性表達略有增強(0.394±0.006)；川芎嗪治療組bcl-2陽性表達明顯增強(0.412±0.005)。三組視網膜神經節(jié)細胞層bcl-2平均光密度總體比較，

7、差異有統(tǒng)計學意義(F=84.658，P<0.05)。高眼壓組bcl-2平均光密度與正常組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；川芎嗪治療組bcl-2平均光密度與其他兩組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結論
　　 1.上鞏膜靜脈燒灼法可以建立穩(wěn)定、持久的大鼠慢性高眼壓模型。
　　 2.川芎嗪對慢性高眼壓大鼠RGCs有一定的保護作用，其可以明顯抑制RGCs的凋亡。
　　 3.川芎嗪可能通過