川芎對慢性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡的影響.pdf

1、背景：青光眼是全球第二位致盲眼病，以視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(retinal ganglioncells，RGCs)的進行性死亡為病理基礎(chǔ)。眼壓升高是其主要的危險因素。青光眼視神經(jīng)保護旨在是延緩或阻止視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的死亡，保護視功能。
　　 目的：建立慢性高眼壓大鼠模型，觀察川芎嗪對慢性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡的影響及相關(guān)凋亡基因bcl-2表達的調(diào)節(jié)，探討川芎嗪對慢性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的保護作用。
　　 方法：健

2、康SD雄性大鼠30只，隨機分為正常組、高眼壓組和川芎嗪治療組，每組10只。采用上鞏膜靜脈燒灼法制作高眼壓模型。用Tono-pen AVVI壓平式眼壓計測量大鼠眼壓。高眼壓組和治療組分別燒灼3條上鞏膜靜脈，正常對照組不做處理。高眼壓持續(xù)7天后川芎嗪治療組給予腹腔注射川芎嗪，正常組和高眼壓組給予等量的生理鹽水。造模4周后取大鼠眼球，行視網(wǎng)膜常規(guī)HE染色、TUNEL原位細胞凋亡檢測和bcl-2免疫組化檢測。采用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)

3、據(jù)分析，各組所測數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±s)表示，三組總體比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用LSD-t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果
　　 1、眼壓測量
　　 造模前所有大鼠平均眼壓為13.83±2.11 mmHg。造模后高眼壓組、川芎嗪治療組眼壓均呈中等程度升高，較術(shù)前眼壓增加了約40％，且4w以來維持穩(wěn)定。兩組各時間點眼壓，與正常組比較差異均有顯著意義(P<0.05)。而術(shù)后高眼壓組

4、、川芎嗪治療組各時間點眼壓比較差異均無顯著意義(P>0.05)。川芎嗪對慢性高眼壓大鼠RGCs的保護作用與眼壓無關(guān)。
　　 2、HE染色
　　 正常對照組視網(wǎng)膜各層次排列規(guī)整，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(RGCs)單層排列，胞核明顯。高眼壓組視網(wǎng)膜萎縮變薄，顏色變淺，內(nèi)核層和外核層排列疏松，RGCs數(shù)量明顯減少，部分細胞出現(xiàn)胞核裂解。川芎嗪治療組視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)層次分明，外核層和內(nèi)核層細胞排列稍紊亂，RGCs較正常組無明顯改變。形態(tài)學顯

5、示川芎嗪治療組視網(wǎng)膜的損傷程度較高眼壓組明顯減輕。
　　 3、TUNEL凋亡檢測
　　 正常組未見TUNEL細胞陽性細胞染色，高眼壓組可見大量深染的棕黃色TUNEL陽性細胞(9.00±0.89)；川芎嗪組可見少量TUNEL陽性細胞(3.50±1.87)。TUNEL陽性細胞主要位于視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層(GCL)。三組TUNEL陽性細胞平均數(shù)總體比較，差異有統(tǒng)計學意義(F=86.16，P<0.05)。高眼壓組TUNEL陽性細胞

6、數(shù)與正常對照組比較，差異有顯著意義(P<0.05)；川芎嗪治療組TUNEL陽性細胞數(shù)與其他兩組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 4、Bcl-2免疫組化檢測
　　 正常組視網(wǎng)膜中bcl-2可見弱陽性表達(0.375±0.004)，高眼壓組bcl-2陽性表達略有增強(0.394±0.006)；川芎嗪治療組bcl-2陽性表達明顯增強(0.412±0.005)。三組視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層bcl-2平均光密度總體比較，

7、差異有統(tǒng)計學意義(F=84.658，P<0.05)。高眼壓組bcl-2平均光密度與正常組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；川芎嗪治療組bcl-2平均光密度與其他兩組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1.上鞏膜靜脈燒灼法可以建立穩(wěn)定、持久的大鼠慢性高眼壓模型。
　　 2.川芎嗪對慢性高眼壓大鼠RGCs有一定的保護作用，其可以明顯抑制RGCs的凋亡。
　　 3.川芎嗪可能通過