急性高眼壓后大鼠視網(wǎng)膜BDNF和TrkB的表達(dá)變化.pdf

1、外源性BDNF對(duì)受損的大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用具有一定的局限性，其機(jī)制可能與 TrkB受體的表達(dá)和活性有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)采用急性高眼壓模型，檢測(cè)BDNF、TrkB和p-TrkB的表達(dá)變化，探索外源性BDNF使用時(shí)機(jī)及使用效果的影響因素。成年健康SD大鼠72只，隨機(jī)分為單純高眼壓組、溶媒對(duì)照組和BDNF預(yù)處理組(溶媒對(duì)照組和BDNF預(yù)處理組大鼠于加壓2天前左眼玻璃體腔注射溶媒或BDNF)，各組動(dòng)物左眼眼壓升高至閃光視網(wǎng)膜電圖b波消失的臨界眼壓

2、(103.5 mmtHg±7.3 mmHg)且維持缺血60分鐘，右眼設(shè)為正常對(duì)照。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別存活1、3、7或14天后，Nissl染色法觀察視網(wǎng)膜的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)視網(wǎng)膜BDNF、TrkB和p-TrkB的表達(dá)變化。結(jié)果顯示：1.Nissl染色：正常視網(wǎng)膜層次清晰，細(xì)胞排列規(guī)則；單純高眼壓組隨著再灌時(shí)間的延長，內(nèi)層視網(wǎng)膜厚度變薄，層次紊亂，節(jié)細(xì)胞層細(xì)胞數(shù)減少；溶媒對(duì)照組視網(wǎng)膜形態(tài)結(jié)構(gòu)改變類似單純高眼壓組；BDNF預(yù)處理

3、組節(jié)細(xì)胞層細(xì)胞數(shù)及內(nèi)層視網(wǎng)膜厚度較單純高眼壓組均有明顯改善。2．免疫組織化學(xué)：在正常視網(wǎng)膜：BDNF免疫陽性產(chǎn)物見于節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)層、內(nèi)核層和視桿視錐層；TrkB免疫染色見于神經(jīng)纖維層、節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)層和內(nèi)核層；p-TrkB免疫染色見于節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)網(wǎng)層和內(nèi)核層。單純高眼壓組急性高眼壓后1、3天BDNF的表達(dá)量與正常對(duì)照組類似，TrkB的表達(dá)顯著上調(diào)，p-TrkB的表達(dá)顯著下調(diào)。7、14天時(shí)BDNF、TrkB、p-TrkB的表達(dá)均下調(diào)。溶

4、媒對(duì)照組急性高眼壓后TrkB，p-TrkB的表達(dá)變化與單純高眼壓組相似。BDNF預(yù)處理組急性高眼壓后1、3天TrkB的表達(dá)顯著上調(diào)，p-TrkB的表達(dá)下調(diào)但顯著高于同時(shí)間點(diǎn)的單純高眼壓組。7天時(shí)TrkB的表達(dá)下調(diào)至正常對(duì)照組水平，14天時(shí)又再次顯著上調(diào)；p-TrkB的表達(dá)在7、14天時(shí)進(jìn)一步下調(diào)，但仍高于同時(shí)間點(diǎn)的單純高眼壓組。以上結(jié)果表明：1．急性高眼壓后大鼠視網(wǎng)膜TrkB的表達(dá)存在時(shí)空變化。損傷早期TrkB表達(dá)的上調(diào)提示此時(shí)視網(wǎng)膜對(duì)