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文檔簡介
1、目的:腎小球腎炎是由多種原因導致腎小球損害為主的變態(tài)反應性疾病,其發(fā)病原因復雜,但大量實驗和臨床研究證明腎小球腎炎的大多數類型都是抗原抗體反應引起的免疫性疾病。隨著腎小球腎炎發(fā)病率的逐年提高,對其的治療手段得到越來越多的關注,目前臨床上常用的治療藥物主要為免疫抑制劑和激素類藥物,所用藥物副作用多,毒性大,可抑制機體正常免疫并導致多種并發(fā)癥。故尋找有效且安全的治療腎小球腎炎的藥物治療已成為當前關注的熱點。傳統(tǒng)中醫(yī)藥中認為蛹蟲草入肺腎,可補
2、腎益腎,平衡陰陽。我們在本室的前期研究的基礎上繼續(xù)研究蛹蟲草不同溶劑提取物的藥理活性,以考察蛹蟲草提取物是否可以作為腎小球腎炎的治療藥物作進一步開發(fā),并為其提供實驗依據。
方法:本研究通過體內和體外實驗兩種方法研究蛹蟲草提取物對免疫系統(tǒng)的影響和對腎小球腎炎的治療作用。體外實驗包括:①考察蛹蟲草不同溶劑提取物對機體免疫系統(tǒng)的影響及相應濃度或劑量范圍。觀察蛹蟲草不同溶劑提取物體外對腎小球系膜細胞增殖,小鼠淋巴細胞轉化,腹腔巨噬
3、細胞吞噬功能實驗的影響,研究其對免疫系統(tǒng)的影響;②體內實驗,通過小鼠碳末廓清實驗和對小鼠遲發(fā)性超敏反應的影響,研究其在整體對免疫系統(tǒng)的影響;從而確認其功能并為后續(xù)研究打下基礎。③建立系膜損傷和增生性腎炎模型,采用抗大鼠胸腺細胞血清制備模型,考察蛹蟲草正丁醇提取物對系膜增生型腎小球腎炎的治療作用。通過測定模型動物的24h尿蛋白,循環(huán)免疫復合物,紅細胞花環(huán)及脾淋巴細胞轉化功能,分析正丁醇提取物的藥理作用,并用電鏡和PAS染色病理切片等客觀指
4、標觀察了模型制作的成功與否,考察了其對抗胸腺細胞血清性腎炎的防治作用。
結果:1、對腎小球系膜細胞增殖的影響:蛹蟲草的甲醇、正丁醇和乙酸乙酯提取物對正常系膜細胞增殖均有抑制作用,但甲醇、正丁醇提取物對LPS刺激激活的系膜細胞更為敏感。
2、對免疫細胞的影響:乙酸乙酯和正丁醇提取物對正常及經ConA,LPS刺激的淋巴細胞轉化均有顯著抑制作用;兩種提取物在較高濃度下顯著性抑制腹腔巨噬細胞的吞噬功能。將正丁醇提取物
5、進一步經大孔樹脂分離后得到的70%乙醇分離部分在較高濃度下顯著抑制腹腔巨噬細胞的吞噬功能;在較低濃度下有促進腹腔巨噬細胞吞噬功能。
3、對循環(huán)免疫復合物的清除作用:蛹蟲草正丁醇提取物10mg/kg給藥組及20mg/kg給藥組可降低模型動物的循環(huán)免疫復合物水平及降低紅細胞CIC花環(huán)率。兩種劑量給藥組的24h尿蛋白降低,其中正丁醇提取物10mg/kg給藥組比較有顯著性差異;P<0.05。
4.正丁醇提取物對大鼠系
6、膜增生型腎小球腎炎的影響:經病理切片(PAS,Masson染色和電鏡)顯示模型大鼠的腎小球系膜基質溶解,系膜細胞增生,基底膜增厚,足突融合及部分腎小球壞死。蛹蟲草正丁醇提取物10mg/kg及20mg/kg給藥組的病理切片各項指標均有改善,其中正丁醇提取物10mg/kg給藥組比較有顯著性差異;P<0.05。
討論:蛹蟲草不同溶劑提取物對免疫系統(tǒng)影響不同,乙酸乙酯提取物對腎小球系膜細胞增殖,淋巴細胞轉化,腹腔巨噬細胞吞噬功能主
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