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文檔簡介
1、目的:原發(fā)性肝癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一,近年來隨著對疾病認識的不斷提高,肝癌的治療水平也不斷發(fā)展,目前,主要采取以手術(shù)切除為主,化療、放療、射頻、生物治療相結(jié)合的綜合治療。由于存在多藥耐藥(Multidrug Resistence,MDR),限制了化療在腫瘤治療上的作用,許多研究嘗試使用藥物進行逆轉(zhuǎn),但收效不明顯。近年來,腫瘤熱療越來越受到人們的重視,國內(nèi)外許多研究認為,化療藥物與加溫并用即熱化療可以增加藥物的細胞毒作用,這在若干
2、細胞株中已經(jīng)得到證實。本實驗通過研究多次加熱對肝癌HepG2細胞肺耐藥蛋白(Lung Resistance Protein,LRP)表達的影響以及加熱后HepG2細胞對阿霉素敏感性的變化。旨在探討熱療與多藥耐藥的關(guān)系及熱化療在肝癌中的治療效果。
方法:肝癌HepG2細胞在42 ℃恒溫水浴箱中加熱,60 min/次,1 次/d,共10d,獲取穩(wěn)定生長的加熱HepG2細胞。以未加熱HepG2細胞為對照,應(yīng)用熒光定量PCR和We
3、stern blot檢測兩種細胞LRP的mRNA和蛋白水平;通過體外細胞毒實驗(MTT法)觀察阿霉素對兩種細胞生長抑制的影響,分析加熱后HepG2細胞對阿霉素敏感性的變化;應(yīng)用流式細胞技術(shù)檢測兩種細胞內(nèi)阿霉素的平均熒光強度,分析加熱對細胞內(nèi)藥物濃度的影響。
結(jié)果:加熱HepG2細胞的LRP mRNA和蛋白水平較未加熱HepG2細胞分別增加(4.01±0.23)和(4.67±0.36)倍,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);未
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