產(chǎn)氣腸桿菌的耐藥性及耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的：在明確湛江地區(qū)產(chǎn)氣腸桿菌耐藥現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上，闡明整合子的流行現(xiàn)狀、分布（定位）及耐藥基因盒種類(lèi)，探討整合子與耐藥性的關(guān)系，為合理使用抗生素，控制耐藥菌株播散提供理論依據(jù)。
　　 方法：⑴采用全自動(dòng)微生物分析儀(VITEK32)鑒定細(xì)菌。⑵抗生素敏感性試驗(yàn):采用紙片擴(kuò)散法（K-B法）測(cè)定70株產(chǎn)氣腸桿菌對(duì)13種抗生素的敏感性;采用瓊脂稀釋法測(cè)定70株產(chǎn)氣腸桿菌對(duì)4種抗生素的最小抑菌濃度。⑶采用雙紙片協(xié)同法篩選ESBLs陽(yáng)性菌株

2、。⑷PCR擴(kuò)增產(chǎn)氣腸桿菌質(zhì)粒和染色體上的整合子及整合子陽(yáng)性株中的可變區(qū)耐藥基因，并做測(cè)序分析。
　　 結(jié)果：①湛江地區(qū)共分離出70株產(chǎn)氣腸桿菌，主要的標(biāo)本來(lái)源為痰液、尿液和血液，分別占標(biāo)本來(lái)源的54.3％、17.1％和8.6％。產(chǎn)氣腸桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的敏感度100％，對(duì)氨芐青霉素耐藥率為100％，其他抗生素則表現(xiàn)出不同程度耐藥。ESBLs的陽(yáng)性率為58.57％(41/70)，ESBLs陽(yáng)性菌株耐藥率整體比陰性菌株高。②頭

3、孢唑啉、頭孢吡肟、頭孢西丁、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦、慶大霉素在整合子陽(yáng)性組中的耐藥率明顯高于整合子陰性組，耐藥率差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;頭孢噻肟、左旋氧氟沙星、丁胺卡那的耐藥率在兩組的差別則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③70株產(chǎn)氣腸桿菌中有15株檢測(cè)到Ⅰ類(lèi)整合子，陽(yáng)性率為21.4％，僅在染色體DNA中檢測(cè)到Ⅰ類(lèi)整合酶的有2株，陽(yáng)性率為2.9％，占陽(yáng)性株的13.3％;僅在質(zhì)粒DNA中檢測(cè)到Ⅰ類(lèi)整合子有3株，陽(yáng)性率為4.3％，占陽(yáng)性株的20.0％;同時(shí)在染

4、色體DNA和質(zhì)粒DNA上都檢測(cè)到Ⅰ類(lèi)整合酶的有10株，陽(yáng)性率為14.3％，占陽(yáng)性株的66.7％。即在染色體DNA上的檢出率為17.1％(12/70)，而在質(zhì)粒上的檢出率為18.8％(13/70)。未檢測(cè)出Ⅱ類(lèi)整合子。④分別以Ⅰ類(lèi)整合子陽(yáng)性株質(zhì)粒DNA和染色體DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增Ⅰ類(lèi)整合子可變區(qū)，分別有13株和12株陽(yáng)性，攜帶大小不等的基因，其中有些陽(yáng)性株含有多個(gè)基因。⑤本地區(qū)產(chǎn)氣腸桿菌攜帶的整合子含耐氨基糖苷類(lèi)抗生素基因aadA1

5、、aadA2和aadA4,耐甲氧芐氨嘧啶抗生素基因dfrA12,耐β-內(nèi)酰胺類(lèi)基因blaIMP-3、blaIMP-4和耐氯霉素基因catB6、catB8。產(chǎn)氣腸桿菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素的耐藥率和耐藥基因攜帶率基本對(duì)應(yīng)。
　　 結(jié)論：⑴產(chǎn)氣腸桿菌主要引起呼吸道、尿路感染，血液感染有增加的趨勢(shì);其多重耐藥趨勢(shì)明顯，耐藥情況嚴(yán)重。⑵產(chǎn)氣腸桿菌Ⅰ類(lèi)整合子陽(yáng)性株比陰性株更容易產(chǎn)生耐藥，同時(shí)在質(zhì)粒和染色體上攜帶Ⅰ類(lèi)整合子的現(xiàn)象常見(jiàn)，提示耐藥基