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1、目的:研究補(bǔ)陰怡神顆粒制備工藝,制定穩(wěn)定可控的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
方法:采用正交試驗(yàn)與單因素試驗(yàn)相結(jié)合,采用紫外分光光度法測(cè)定多糖及蛋白質(zhì)含量,優(yōu)選熟地黃粗多糖提取、純化工藝,對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析;采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),以干樹(shù)脂:藥材、上樣流速、乙醇濃度、乙醇用量為考察因素,以酸棗仁總黃酮、酸棗仁皂苷A為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo),優(yōu)選酸棗仁醇提物提取、精制工藝;采用醇提-大孔吸附樹(shù)脂法提取、純化知母總皂苷,以正交試驗(yàn)優(yōu)選含量測(cè)定前處理?xiàng)l件,采用高效
2、液相色譜-蒸發(fā)光散射法測(cè)定菝葜皂苷元含量,驗(yàn)證工藝的穩(wěn)定可控性;采用L9(3)4正交試驗(yàn),以加水量、提取次數(shù)、提取時(shí)間為考察因素,以抗焦慮藥效學(xué)指標(biāo)-小鼠開(kāi)臂進(jìn)入次數(shù)百分比(OE%)、開(kāi)閉滯留時(shí)間百分比(OT%)、穿箱次數(shù)為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo),優(yōu)選百合水提工藝;采用均勻試驗(yàn)設(shè)計(jì)法,優(yōu)選四藥藥效物質(zhì)最優(yōu)配比;采用濕法制顆粒,對(duì)輔料進(jìn)行篩選,并對(duì)顆粒成型性、堆密度、休止角、溶化性、相對(duì)臨界濕度進(jìn)行考察,口嘗篩選矯味劑的種類(lèi)和用量。根據(jù)優(yōu)選的工藝,
3、自制3批顆粒。采用薄層層析鑒別3批顆粒劑中知母藥材,采用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法對(duì)顆粒中菝葜皂苷元進(jìn)行含量測(cè)定。
結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:熟地黃粗多糖最佳提取、純化工藝為:加8倍量水,浸提2次,每次4h;最佳醇沉濃度為80%,氯化鈣最佳濃度為(V/W)7%。酸棗仁最佳工藝:80%乙醇提取,干樹(shù)脂:藥材為1:1,洗脫乙醇濃度為50%,洗脫用量為4倍樹(shù)脂床體積。3批知母總皂苷樣品中菝葜皂苷元平均含量為19.84%,且含量測(cè)定前處理最
4、佳條件為:知母總皂苷0.025g,加鹽酸3mL,回流1h,萃取2次,每次用氯仿40mL。百合水提最佳工藝為:6倍量水,提取4次,每次45min。篩選出四藥藥效物質(zhì)熟地黃粗多糖:百合水提物:酸棗仁醇提物、知母總皂苷最佳配比為0.125:0.400:0.060:0.050。確定干藥粉:可溶性淀粉:糊精為1:05:0.5,潤(rùn)濕劑乙醇濃度為70%,甜菊苷用量為1%,相對(duì)臨界濕度為60%。制劑鑒定出知母藥材斑點(diǎn)清晰,分離良好,陰性無(wú)干擾。含量測(cè)定
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