雷帕霉素與紫杉醇對(duì)血管成形術(shù)后再狹窄作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 評(píng)價(jià)雷帕霉素、紫杉醇等抗增殖藥物對(duì)血管成形術(shù)（percutaneous transluminal angioplasty，PTA）后新生內(nèi)膜增生及血管重塑的影響；評(píng)價(jià)雷帕霉素、紫杉醇對(duì)PTA后血管內(nèi)皮化及血管壁凝血相關(guān)因子的影響；比較不同給藥方式下紫杉醇對(duì)PTA后新生內(nèi)膜增生及血管壁凝血相關(guān)因子的影響。 材料與方法： 1.建立大鼠頸總動(dòng)脈損傷模型。 2.采取外膜給藥（以pluonic F-127為

2、藥物釋放載體），測(cè)定大鼠頸總動(dòng)脈損傷后15天、30天新生內(nèi)膜、中膜厚度與面積，分別計(jì)算內(nèi)膜與中膜面積比、狹窄率、內(nèi)彈力膜及外彈力膜圍繞面積等指標(biāo)，與對(duì)照組進(jìn)行比較，觀察并定量分析在抗增殖藥物影響下血管壁大體形態(tài)學(xué)變化。 3.采取外膜給藥，以CD31標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)抗增殖藥物對(duì)血管內(nèi)皮化的影響；通過(guò)免疫組化及原位雜交評(píng)估抗增殖藥物對(duì)血管壁組織因子（tissue factor，TF）、組織型纖溶酶原激活劑（tissue type

3、 plasminogen activator，t-PA）及纖溶酶原激活物抑制劑1（inhibitors of plasminogen activator-1，PAI-1）表達(dá)的影響。 4.采取腔內(nèi)給藥，觀察不同濃度紫杉醇局部瞬時(shí)給藥對(duì)損傷后新生內(nèi)膜增生、血管內(nèi)皮化的影響及其血栓形成傾向，與外膜給藥進(jìn)行比較。 結(jié)果： 1.外膜給藥，損傷后15天、30天，雷帕霉素（300μg/100μl組及600μg/100μl組）

4、及紫杉醇（20μg/100μl及40μg/100μl）實(shí)驗(yàn)組新生內(nèi)膜厚度及面積、內(nèi)膜與中膜面積比及狹窄率均低于對(duì)照組（P<0.01）；對(duì)血管重塑的影響，損傷后30天兩種抗增殖藥物組均出現(xiàn)內(nèi)、外彈力膜圍繞面積的縮?。≒<0.05）；兩種抗增殖藥物高低兩種濃度對(duì)血管壁的影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。 2.外膜給藥，損傷后15天、30天，雷帕霉素及紫杉醇實(shí)驗(yàn)組不同程度阻礙損傷后血管內(nèi)皮化，內(nèi)膜游離緣不光整并且出現(xiàn)異常增大變形的內(nèi)皮細(xì)胞；與對(duì)照組相

5、比，雷帕霉素及紫杉醇實(shí)驗(yàn)組新生內(nèi)膜中TF mRNA及TF的表達(dá)高于對(duì)照組（P<0.05），TF在新生內(nèi)膜具有向心性分布的特點(diǎn)，即主要集中于新生內(nèi)膜游離緣，損傷后30天尤為明顯：與對(duì)照組相比，雷帕霉素及紫杉醇實(shí)驗(yàn)組新生內(nèi)膜PAI-1 mRNA及PAI-1的表達(dá)高于對(duì)照組（P<0.05）；雷帕霉素與紫杉醇實(shí)驗(yàn)組新生內(nèi)膜t-PA蛋白的表達(dá)低于對(duì)照組（P<0.05）。 3.腔內(nèi)瞬時(shí)給藥：血管損傷后15天及30天，紫杉醇高濃度（180μg

6、/30μl）2分鐘、10分鐘組及低濃度（90μg/30μl）10分鐘組新生內(nèi)膜厚度、面積、內(nèi)膜與中膜面積比及狹窄率等均低于對(duì)照組（P<0.05）；內(nèi)、外彈力膜圍繞面積測(cè)定顯示，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；與對(duì)照組相比較，實(shí)驗(yàn)組TF mRNA及TF蛋白在新生內(nèi)膜中的表達(dá)與對(duì)照組沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P>0.05）；實(shí)驗(yàn)組對(duì)新生內(nèi)膜中PAI-1mRNA的影響與對(duì)照組相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P>0.05）；對(duì)于PAI-1蛋白在新生內(nèi)膜中的表達(dá)，高濃

7、度10分鐘組高于對(duì)照組（P<0.05），而其他3組（高濃度2分鐘、低濃度2分鐘及10分鐘組）與對(duì)照組相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P>0.05）；對(duì)新生內(nèi)膜中t-PA蛋白表達(dá)的影響，實(shí)驗(yàn)組除了高濃度2分鐘組低于對(duì)照組（P<0.05）以外，其余各組雖然在數(shù)值上低于對(duì)照組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1.雷帕霉素與紫杉醇外膜給藥緩慢持續(xù)釋放有效的抑制PTA后新生內(nèi)膜增生。 2.雷帕霉素與紫杉醇外膜給藥緩慢持續(xù)釋放具有一定的負(fù)性重

8、塑效應(yīng)（本實(shí)驗(yàn)中損傷后30天），此效應(yīng)對(duì)于以支架作為釋放載體來(lái)說(shuō)意義不大，但對(duì)于非支架釋放載體以及未來(lái)新治療方式的研發(fā)具有一定參考意義。 3.雷帕霉素與紫杉醇外膜給藥緩慢持續(xù)釋放在抑制PTA后新生內(nèi)膜增殖的同時(shí)阻礙內(nèi)皮化，再生或殘存內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生形態(tài)改變。 4.雷帕霉素與紫杉醇外膜給藥緩慢持續(xù)釋放誘導(dǎo)損傷后血管內(nèi)膜TF在mRNA及蛋白水平的表達(dá)，并且TF蛋白有沿內(nèi)膜腔面游離緣分布的特點(diǎn)。 5.雷帕霉素與紫杉醇外膜給