HPV基因型分布及液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV分型檢測(cè)和HPV16DNA整合狀態(tài)在宮頸病變篩查和診治中的應(yīng)用價(jià)值.pdf

1、人乳頭瘤病毒是世界范圍內(nèi)與惡性腫瘤相關(guān)的首要感染性因素。HPV感染是宮頸癌的主要致病因素，目前大量研究致力于對(duì)宮頸病變的早期篩查，面臨的問(wèn)題在于細(xì)胞學(xué)篩查主觀性較強(qiáng)，而HPV檢測(cè)較之更為客觀、靈敏，但是對(duì)宮頸病變的特異性較差，且HPV大多為一過(guò)性感染，只有很小一部分發(fā)展為宮頸癌，有研究表明HPVDNA整合在宮頸病變的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，其是否可預(yù)測(cè)發(fā)生宮頸高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變的風(fēng)險(xiǎn)是本實(shí)驗(yàn)的研究目的，本研究擬通過(guò)對(duì)就診于我院婦科門(mén)診的婦女

2、宮頸HPV感染情況進(jìn)行流行病學(xué)特征分析，來(lái)初步了解我院婦科門(mén)診HPV基因型分布，評(píng)價(jià)TCT和HPV分型檢測(cè)以及二者聯(lián)合檢測(cè)的在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值，并研究HPVDNA整合狀態(tài)與不同級(jí)別宮頸病變的相關(guān)性。
　　 第一部分，HPV基因型分布及探討HPV分型檢測(cè)和液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)在宮頸病變篩查和診斷中的應(yīng)用價(jià)值
　　 目的:
　　 1、通過(guò)HPV分型檢測(cè)了解于我院門(mén)診行宮頸病變篩查和診治婦女的HPV型別及年齡分布，了

3、解HPV流行病學(xué)特征，為政府制定疫苗的預(yù)防政策提供理論依據(jù)。
　　 2、研究液基細(xì)胞學(xué)在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值。
　　 3、研究HPV分型檢測(cè)在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價(jià)值，并探討HPV基因型與宮頸病變組織病理學(xué)的關(guān)系，HPV多重感染與宮頸病變關(guān)系，HPV分型檢測(cè)在細(xì)胞學(xué)結(jié)果為ASCUS患者的分流作用。
　　 4、研究液基細(xì)胞學(xué)和HPV分型檢測(cè)聯(lián)合應(yīng)用在宮頸病變的篩查和診斷中的應(yīng)用價(jià)值。
　　 方法:

4、>　　 第一部分，選取2009.01～2012.09所有于我院婦科門(mén)診行宮頸病變篩查和診治的患者為研究對(duì)象，回顧性研究7209例行凱普21種HPV分型檢測(cè)的患者的型別和年齡分布特征，年齡16-80歲，平均(36.3±9.8)歲。第二部分，選取于我院行TCT或HPV分型檢測(cè)者為研究對(duì)象，細(xì)胞學(xué)診斷采用TBS診斷系統(tǒng)，其中對(duì)細(xì)胞學(xué)結(jié)果大于等于ASCUS，或HPV檢測(cè)高危型陽(yáng)性者，行陰道鏡檢查，對(duì)異常陰道鏡圖像者采取多點(diǎn)活檢送病理。以病理診

5、斷作為金標(biāo)準(zhǔn)，將研究對(duì)象按組織病理學(xué)診斷分為炎癥，CIN1，CIN2，CIN3和宮頸癌組。
　　 結(jié)果:
　　 1、在7209例研究對(duì)象中，HPV總感染率為52.74％(3802/7209)，21種型別除HPV43外均被檢出，感染率最高的型別是HPV16(18.26％，1316/7209)，感染率最低的型別是HPV43(0.0％)未檢出，感染前四位的高危型別依次為HPV16、58、52、18，而最常見(jiàn)的低危型別為HPV6

6、。
　　 2、研究對(duì)象中單一感染率為34.11％(2459/7209)，多重感染率為18.63％(1343/7209)，HPV在20-24歲組和50歲以上組的檢出率最高，且不同年齡段感染率分布為雙峰“U”型。
　　 3、TCT預(yù)測(cè)CIN2及以上宮頸病變的靈敏度(sE)為57.61％(53/92)，特異度(sP)為52.56％(82/156)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV):41.73％(53/127)，陰性預(yù)測(cè)值(NPV):67.

7、77％(82/121)，誤診率:47.44％，漏診率:42.39％，陽(yáng)性似然比為1.21，陰性似然比為0.81，OR值=1.49。
　　 4、HPV分型檢測(cè)預(yù)測(cè)CIN2及以上宮頸病變的靈敏度(SE)為83.70％(77/92)，特異度(SP)為26.92％(42/156)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV):40.31％(77/191)，陰性預(yù)測(cè)值(NPV):73.68％(42/57)，誤診率16.30％，漏診率73.08％，陽(yáng)性似然比為5.

8、13，陰性似然比為2.71，OR值=1.89。
　　 5、TCT聯(lián)合HPV分型檢測(cè)預(yù)測(cè)CIN2及以上宮頸病變的靈敏度(SE)為93.48％(86/92)，特異度(sP)為12.82％(20/156)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV):38.74％(86/222)，陰性預(yù)測(cè)值(NPV):76.92％(20/26)，誤診率為:87.18％，漏診率為:6.52％，陽(yáng)性似然比(LR+):為1.07，陰性似然比(LR—):為0.51，OR值=陽(yáng)性似然

9、比/陰性似然比，為2.10。
　　 6、各級(jí)別宮頸病變中最常見(jiàn)的型別均為HPV16型。
　　 結(jié)論:
　　 就診于我院的患者中HPV總感染率52.70％，感染前五位的型別依次為HPV16、6、58、52、18。其中位居前三位的高危型別是HPV16、58、52，為政府制定疫苗的預(yù)防政策提供理論依據(jù)。細(xì)胞學(xué)結(jié)果為ASCUS的患者中，病理組織學(xué)結(jié)果可以從炎癥到宮頸上皮內(nèi)高級(jí)別病變，甚至宮頸癌。HPV用于診斷CIN2及其

10、以上病變的靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值均較高，HPV分型檢測(cè)可以作為ASCUS患者的分流手段，在一定程度上減少重復(fù)細(xì)胞學(xué)檢查，減輕患者的心理負(fù)擔(dān)，并可防止隨訪中高危人群的失訪。在不同級(jí)別宮頸病變中，HPV的檢出率隨著宮頸病變級(jí)別的升高而有增高的趨勢(shì)。TCT聯(lián)合HPV檢測(cè)可明顯提高宮頸病變的檢出率，其在宮頸癌前病變和宮頸癌的篩查中起重要作用。HPV是宮頸病變及宮頸癌發(fā)生發(fā)展的重要病原學(xué)因素，病毒持續(xù)感染可以導(dǎo)致宮頸高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變甚至宮頸癌的發(fā)生。

11、
　　 第二部分，探討HPV16DNA整合狀態(tài)與不同級(jí)別宮頸病變的相關(guān)性以及預(yù)測(cè)高級(jí)別宮頸病變發(fā)生的價(jià)值
　　 目的:
　　 目前的研究已明確高危型HPV持續(xù)感染是引起宮頸高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌的主要原因。但大多數(shù)感染為一過(guò)性的，HPV分型檢測(cè)篩查宮頸病變的特異性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均較低，而HPV16是最常見(jiàn)的型別，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑檠芯縃PV16陽(yáng)性者的病毒整合狀態(tài)和不同級(jí)別宮頸病變的關(guān)系，以及HPV16整合型對(duì)CIN2

12、及以上病變的預(yù)測(cè)和診斷價(jià)值。
　　 方法:
　　 選擇已明確病理學(xué)結(jié)果且為HPV16陽(yáng)性的165例患者為研究對(duì)象，其中宮頸炎18例，CIN124例，CIN245例，CIN351例，宮頸癌27例。運(yùn)用多重PCR檢測(cè)165例患者剩余宮頸脫落細(xì)胞中HPV16DNA的E2、E6基因，PCR產(chǎn)物于2％的瓊脂糖凝膠電泳，并通過(guò)凝膠圖像分析系統(tǒng)得到E2和E6的面積灰度值，通過(guò)比較E2和E6的面積灰度值來(lái)得到E2/E6的值，進(jìn)而判斷HP

13、V16DNA在體內(nèi)的整合狀態(tài)。
　　 結(jié)果:
　　 1、在炎癥組中單一感染率為38.89％，CIN1組中單一感染率為45.83％，CIN2組中為68.89％，CIN3組中單一感染率為62.74％，宮頸癌中單一感染率為85.19％。將不同組別的HPV單一感染率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，x2=13.900，P＜0.05，可見(jiàn)隨著宮頸病變級(jí)別的升高，HPV16單一型別的檢出率逐漸增加。
　　 2、在炎癥組、CIN1組、CIN2組

14、、CIN3組、宮頸癌組中整合型（即混合型）的檢出率分別為16.7％(3/18)、20.8％(5/24)、46.7％(21/45)、62.7％(32/51)、77.8％(21/27)，將不同級(jí)別宮頸病變整合型的檢出率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，x2=28.009，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3、HPV16DNA整合狀態(tài)診斷宮頸病變的靈敏度(SE)為60.16％，特異度(sP)為79.07％，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV):90.24％，陰性