工頻磁場對人早孕絨毛滋養(yǎng)細胞分泌功能及凋亡相關基因表達的影響.pdf

1、工頻磁場是由50或60 Hz交變電流所產生的磁場,屬于極低頻磁場.它通常存在于工農業(yè)電器設備、家用電器及輸變電設施周圍.近年來,電力事業(yè)的迅猛發(fā)展及電器設施的廣泛應用,使得人們日常生活及工作環(huán)境中極低頻電磁場的強度不斷增高,成為新的污染源. 近三十年來,陸續(xù)有流行病學調查報道孕期暴露于工頻磁場可引起流產、宮內生長發(fā)育遲緩、先天畸形、低出生體重、死胎、性別比改變等不良妊娠結局,并在部分動物實驗和體外實驗中得到證實,引起了公眾的迫切

2、關心和學者的廣泛關注.但同時,也有部分流行病學調查、動物實驗、體外實驗報道工頻磁場對妊娠結局并無有害效應.陰陽性兩方面的結果使得目前無法對工頻磁場的健康影響作出科學評價. 妊娠結局直接關系到未來人口質量,因此迫切需要加強此方面的研究.而現(xiàn)有的流行病學調查和動物實驗結果存在著矛盾,無法得到一致的結論.如果能在作用機制上有所發(fā)現(xiàn),那么便可以為流行病學調查、動物實驗研究結論提供解釋和支持,同時,也可為環(huán)境電磁場標準制定提供一定依據(jù).因

3、此,探明工頻磁場的作用機制應當是解決問題的關鍵. 正常妊娠的維持有賴于母體胎盤,尤其是滋養(yǎng)細胞的正常功能.一方面,胎盤滋養(yǎng)細胞是人絨毛促性腺激素(HCG)和孕酮的主要來源;另一方面,滋養(yǎng)細胞是構成胎兒與母體間胎盤屏障的主要成分之一.目前已經證明,HCG和孕酮對維持早期妊娠起到非常關鍵的作用,分泌減少極有可能導致流產.外界不良因素,如藥物等,可通過誘導滋養(yǎng)細胞的過度凋亡,直接影響胎盤屏障的完整性以及減少HCG和孕酮激素的分泌,從而

4、導致不良效應的產生,這是外界因素致不良妊娠結局的主要機制.本學位論文計劃從這兩方面探討工頻磁場的作用機制. 為此,本研究在嚴格控制實驗條件下,采用人孕早期絨毛滋養(yǎng)細胞為研究對象,研究工頻磁場對外界因素導致不良妊娠結局的重要靶位-胎盤滋養(yǎng)細胞分泌功能和凋亡的影響,以直觀地反映工頻磁場的生殖健康效應及其可能的作用機制.第一部分:工頻磁場對人早孕絨毛滋養(yǎng)細胞分泌功能的影響每個絨毛分離所得的滋養(yǎng)細胞接種于10個四孔培養(yǎng)板小孔中,隨機分為

5、兩組,第一組為輻照組,5孔細胞放入輻照系統(tǒng),以50 Hz、0.4 mT及0.2 mT的工頻磁場分別輻照6、12、24、48、72 h;第二組為對照組,5孔細胞放入培養(yǎng)箱,除不接受輻照外其他條件與輻照組相同.在各時間點將輻照組細胞與其相應的對照組細胞同時取出,吸取上清液,測定HCG和孕酮含量.結果顯示0.4 mT.磁場輻照后,72 h亞組HCG及孕酮分泌量的變化倍數(shù)分別為(0.77±0.18)和(0.54±0.21),差異有統(tǒng)計學意義(P

6、<0.05,P<0.01);0.2 mT磁場輻照后各時間亞組HCG、孕酮分泌量變化倍數(shù)平均值均接近1,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05).結果表明,較高強度、長時間工頻磁場輻照對體外培養(yǎng)的人早孕絨毛滋養(yǎng)細胞分泌功能有抑制作用.第二部分:工頻磁場對人早孕絨毛滋養(yǎng)細胞凋亡相關基因表達的影響每個絨毛分離所得的滋養(yǎng)細胞接種于6個四孔培養(yǎng)板小孔中,隨機分為兩組,第一組為輻照組,3孔細胞放入輻照系統(tǒng),以50 Hz、0.4 mT的工頻磁場分別輻照6、

7、48、72 h;第二組為對照組,3孔細胞放入培養(yǎng)箱,除不接受輻照外其他條件與輻照組相同.在各時間點將輻照組細胞與其相應的對照組細胞同時取出,提取總RNA,用熒光定量逆轉錄一聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測Bcl-2、Bax、Caspase-3、p53、Fas等凋亡相關基因轉錄水平的改變.結果發(fā)現(xiàn)0.4 mT磁場輻照6、48、72 h后,各基因表達變化倍數(shù)平均值均接近1,差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),說明0.4 mT工頻磁場輻照6、

8、48、72 h不影響B(tài)cl-2、Bax、Caspase-3、p53、Fas等基因的轉錄水平,推測工頻磁場抑制滋養(yǎng)細胞HCG和孕酮分泌可能不通過促進凋亡這一途徑,其影響激素分泌的具體機制有待進一步探索. 結論: 在本研究條件下,基于上述實驗結果,可得出以下結論: 1、較高強度、長時間工頻磁場輻照對體外培養(yǎng)的人早孕絨毛滋養(yǎng)細胞分泌功能有抑制作用; 2、0,4.mT工頻磁場輻照體外培養(yǎng)的人早孕絨毛滋養(yǎng)細胞6、4