白三烯受體拮抗劑與糖皮質(zhì)激素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥的影響.pdf

1、目的：以哮喘動(dòng)物模型為基礎(chǔ)，通過(guò)觀察白三烯受體拮抗劑孟魯司特鈉與糖皮質(zhì)激素地塞米松聯(lián)合應(yīng)用對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥的影響，試圖證明通過(guò)聯(lián)合應(yīng)用白三烯受體拮抗劑，可以減少激素的用量且能達(dá)到較好的抗炎效果，為臨床上需應(yīng)用大劑量激素治療的部分哮喘患兒探尋一種有效且副作用相對(duì)小的綜合治療方案，為指導(dǎo)臨床治療提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：將40只雌雄各半的Wistar大鼠隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、哮喘模型組、孟魯司特鈉組(MK組)、地塞米松組、孟魯

2、司特鈉地塞米松聯(lián)合用藥組，每組8只。除正常對(duì)照組外，其余4組于第1天和第7天分2次腹腔注射抗原液1ml(含OVA 100mg、氫氧化鋁干粉100mg)致敏，正常對(duì)照組用等量的生理鹽水進(jìn)行致敏。第14天開始將大鼠放入自制的不完全封閉的有機(jī)玻璃箱內(nèi)，予1％OVA溶液用壓縮霧化機(jī)噴霧激發(fā)，每天1次，每次20分鐘，共激發(fā)10天，正常對(duì)照組用等量的生理鹽水進(jìn)行激發(fā)。第17天開始除正常對(duì)照組、哮喘模型組以外，其余三組每次霧化吸入激發(fā)前半小時(shí)給予藥物

3、干預(yù)，MK組給予MK(2mg/只)灌胃，地塞米松組給予地塞米松(0.75mg/kg)灌胃，聯(lián)合用藥組給予MK(1mg/只)+地塞米松(0.375mg/kg)灌胃。正常對(duì)照組和哮喘模型組給予等量生理鹽水灌胃，均每天1次，共7天。第23天，末次激發(fā)結(jié)束后12小時(shí)內(nèi)，各組大鼠均采用斷頭取血法取血備用。隨后將大鼠固定于手術(shù)臺(tái)上，分離氣管，結(jié)扎右肺，左肺用注射器將2ml生理鹽水(37℃)經(jīng)氣管插管注入肺內(nèi)，來(lái)回抽洗兩次(不停留)，收取支氣管肺泡灌

4、洗液(BALF)。采用常規(guī)計(jì)數(shù)法檢測(cè)外周血中EOS數(shù)量，ELISA法檢測(cè)血清和BALF中IFN-γ、IL-4含量，放射免疫分析法檢測(cè)血清一氧化氮(NO)及內(nèi)皮素-1(ET-1)含量。結(jié)果： 1各實(shí)驗(yàn)組哮喘大鼠外周血中EOS數(shù)量比較模型組外周血中EOS計(jì)數(shù)明顯高于正常組，差異有非常顯著性(P<0.001)；各用藥組外周血中EOS計(jì)數(shù)均低于模型組，地塞米松組、聯(lián)合用藥組與模型組相比差異有顯著性(P<0.01)，MK組與模型組相比差異

5、無(wú)顯著性(P>0.05)：MK組EOS計(jì)數(shù)高于地塞米松組，兩組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)；聯(lián)合用藥組EOS計(jì)數(shù)低于地塞米松組，兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；MK組EOS計(jì)數(shù)高于聯(lián)合用藥組，兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 2各實(shí)驗(yàn)組哮喘大鼠血清及BALF中IFN-γ濃度的比較模型組血清及BALF中IFN-γ的含量均明顯低于正常組，差異均有非常顯著性(P<0.001)；各用藥組血清及BALF中IFN-γ的含量均

6、高于模型組，且各用藥組與模型組相比差異均有顯著性(P<0.01)；MK組血清及BALF中IFN-γ的含量均低于地塞米松組，兩組含量相比差異均有顯著性(P<0.01)；聯(lián)合用藥組血清及BALF中IFN-γ的含量均低于地塞米松組，但兩組相比差異均無(wú)顯著性(P>0.05)；MK組血清及BALF中IFN-γ的含量均低于聯(lián)合用藥組，兩組相比差異均有顯著性(P<0.05)。 3各實(shí)驗(yàn)組哮喘大鼠血清及BALF中IL-4濃度的比較模型組血清及BALF中

7、IL-4的含量均明顯高于正常組，差異均有非常顯著性(P<0.001)；各用藥組血清及BALF中IL-4的含量均低于模型組，地塞米松組、聯(lián)合用藥組與模型組相比差異均有顯著性(P<0.01)，MK組與模型組相比差異亦均有顯著性(P<0.05)；MK組血清及BALF中IL-4的含量均高于地塞米松組，兩組相比差異均有顯著性(P<0.01)；聯(lián)合用藥組血清及BALF中IL-4的含量均低于地塞米松組，兩組相比差異均無(wú)顯著性(P>0.05)；MK組血

8、清及BALF中IL-4的含量均高于聯(lián)合用藥組，兩組相比差異均有顯著性(P<0.01)。 4各實(shí)驗(yàn)組哮喘大鼠血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值的比較模型組血清及BALF中IFN-γ/IL-4的比值均明顯低于正常組，差異均有非常顯著性(P<0.001)；各用藥組血清及BALF中IFN-γ/IL-4的比值均高于模型組，各用藥組與模型組相比差異均有顯著性(P<0.01)；MK組血清及BALF中IFN-γ/IL-4的比值均低于地塞米

9、松組，兩組比值相比差異均有顯著性(P<0.01)；聯(lián)合用藥組血清中IFN-γ/IL-4的比值高于地塞米松組.兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；聯(lián)合用藥組BALF中IFN-γ/IL-4的比值低于地塞米松組，兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；MK組血清及BALF中IFN-7/IL-4的比值均低于聯(lián)合用藥組，兩組相比差異均有顯著性(P<0.01)。 5各實(shí)驗(yàn)組哮喘大鼠血清中NO濃度的比較模型組血清中NO的含量明顯高于正常組，差

10、異有非常顯著性(P<0.001)；各用藥組血清中NO的含量均低于模型組，MK組、聯(lián)合用藥組與模型組相比差異均有顯著性(P<0.05)，地塞米松組與模型組含量相比差異亦有顯著性(P<0.01)；MK組血清中NO的含量高于地塞米松組，兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；聯(lián)合用藥組血清中NO含量高于地塞米松組，兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；MK組血清中NO的含量高于聯(lián)合用藥組，兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 6各實(shí)驗(yàn)組哮喘大

11、鼠血清中ET-1濃度的比較模型組血清中ET-1的含量明顯高于正常組，差異有非常顯著性(P<0.001)；各用藥組血清中ET-1的含量均低于模型組，地塞米松組、聯(lián)合用藥組與模型組相比差異均有顯著性(P<0.01)，MK組與模型組相比差異亦有顯著性(P<0.05)；MK組血清中ET-1的含量高于地塞米松組，兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；聯(lián)合用藥組血清中ET-1的含量低于地塞米松組，兩組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；MK組血清中E