子宮內膜樣腺癌組織中microRNA差異表達譜分析及其靶基因預測的研究.pdf

1、研究背景與目的:子宮內膜癌是累及女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,在很多歐美國家,其發(fā)病率居女性生殖系統(tǒng)癌癥的首位。而在我國,子宮內膜癌的發(fā)病率也僅次于子宮頸癌,居女性生殖系統(tǒng)癌癥的第二位,且有逐年上升趨勢。子宮內膜癌中有85％-90％為Ⅰ型子宮內膜樣腺癌(雌激素依賴型),嚴重危害女性健康。目前認為子宮內膜癌的發(fā)生可能與長期持續(xù)的雌激素刺激或者肥胖、高血壓、糖尿病、不孕等因素相關,但其機制尚不明確。因此對子宮內膜癌尤其是內膜樣腺癌發(fā)病機

2、制和新診斷方法的探討與研究十分必要。
　　 microRNA(MicroRNA)是一種由22-25個核苷酸組成的非編碼單鏈小RNA,目前認為在哺乳動物體內,microRNA與靶基因作用,使靶基因的mRNA在轉錄后的翻譯過程中被抑制或直接降解,導致靶基因的蛋白表達水平降低,從而間接參與到包括生長發(fā)育、造血、器官形成、細胞增殖、凋亡乃至腫瘤發(fā)生的過程中。近些年來,很多研究圍繞著microRNA與各種腫瘤間的關系展開,而針對子宮內膜樣

3、腺癌中microRNA變化的研究目前尚不多。
　　 本研究通過篩查子宮內膜樣腺癌組織與正常對照組子宮內膜組織中microRNA的表達差異,同時結合已有資料對表達差異明顯的microRNA進行靶基因預測,并使用微陣預測分析(PAM)工具初步預測一組可以用于區(qū)分不同病理分化子宮內膜樣腺癌的microRNA。進而從分子學水平探討子宮內膜樣腺癌的發(fā)病機制。
　　 方法:
　　 1.使用丹麥ExiqonTM公司microR

4、NA芯片檢測出子宮內膜樣腺癌組織和正常內膜組織microRNA表達譜,篩選出表達差異明顯的microRNA。
　　 2.挑選出上調及下調明顯的microRNA各1例使用實時定量逆轉錄PCR(realtime RT-PCR)進行驗證。
　　 3.結合以往研究中與子宮內膜樣腺癌及子宮內膜癌關系密切的基因結果,使用三種不同的預測軟件對本實驗中出現(xiàn)明顯差異表達的microRNA進行靶基因預測,并統(tǒng)合結果。
　　 4.使用

5、微陣預測分析工具處理高、中、低分化子宮內膜樣腺癌及正常內膜中表達的microRNA數(shù)據(jù),初步得出一組能夠區(qū)分以上四組樣本的microRNA標記。
　　 結果:
　　 1.在芯片覆蓋的847條人microRNA中,子宮內膜樣腺癌組織相較于正常內膜組織出現(xiàn)18個明顯上調,31個明顯下調的microRNA。
　　 2.包括PTEN、FOX家族等基因在內的51種基因被認為是上述差異表達的microRNA的預測靶基因。

6、r>　　 3.Mir-200c等9種microRNA是一組可用于鑒別不同分化子宮內膜樣腺癌的生物標記microRNA。
　　 結論:
　　 1.相較于正常內膜組織,多種microRNA在子宮內膜樣腺癌中出現(xiàn)明顯表達差異。
　　 2.mir-205等microRNA在子宮內膜樣腺癌中表現(xiàn)出明顯的變化趨勢,可能是影響子宮內膜樣腺癌發(fā)生發(fā)展的關鍵microRNA。
　　 3.mir-205、mir-200家族