姜黃素防治博萊霉素誘導大鼠肺纖維化作用機理的實驗研究.pdf

1、特發(fā)性肺間質纖維化(idiopathicpulmonaryfibrosis，IPF)，是指原因不明的慢性炎癥性間質性肺疾病，以彌漫性肺泡炎、肺泡結構紊亂和最終導致肺纖維化為特征，肺功能檢測表現(xiàn)為限制性通氣功能障礙及彌散功能障礙。據(jù)流行病學調查，病人的發(fā)病年齡通常在50-70歲之間，年發(fā)病率在萬分之7-10，平均存活率不到3年(自診斷為纖維化時起)，而且隨著年齡的增長，其發(fā)病率和死亡率也升高。直至今日，IPF治療尚無特效藥物。因此，肺纖維

2、化已成為臨床治療的難點，研究肺纖維化發(fā)病機理和尋找行之有效的治療藥物是目前醫(yī)學界迫切需要解決的問題。 為探討姜黃素對肺纖維化大鼠的防治作用，我們以博萊霉素誘導大鼠肺纖維化為模型，從整體與分子水平闡明姜黃素的作用和作用機理，以期為臨床防治肺纖維化提供更準確、科學地用藥提供實驗基礎。 研究內(nèi)容及結果1姜黃素防治肺纖維化的藥效學研究本實驗研究姜黃素對肺纖維化大鼠細胞外基質和肺功能的影響SD雄性大鼠144只，分為假手術組，模型組

3、，姜黃素高，中，低劑量組，醋酸潑尼松組，每組24只。除假手術組外其余各組大鼠氣管內(nèi)一次性滴注鹽酸博萊霉素，假手術組大鼠氣管內(nèi)一次性滴注等體積的生理鹽水。造模后第1天開始給藥，持續(xù)到處死動物的前一天。姜黃素高，中，低劑量組分別為200，100，50mg·kg-1·d-1，醋酸潑尼松組0.56mg·kg-1·d-1，假手術組，模型組分別灌服等體積的生理鹽水。各組動物于7，14，28d測定大鼠肺功能后處死，分別觀察大鼠肺組織羥脯氨酸(HYP)

4、和血清中Ⅲ型膠原(Ⅲ-C)，Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)及層黏連蛋白(LN)和透明質酸(HA)的含量，同時取肺組織進行HE，Mallory染色。 結果表明：姜黃素可改善肺纖維化大鼠的肺功能，降低肺纖維化大鼠肺組織羥脯氨酸含量，降低肺纖維化大鼠血清中Ⅰ、Ⅲ型膠原、層粘連蛋白及透明質酸含量，減輕肺組織纖維性增生。提示：姜黃素可能是通過降低肺纖維化大鼠細胞外基質含量而發(fā)揮預防和治療肺纖維化作用。 2姜黃素防治肺纖維化作用機理的研究2.1

5、姜黃素對肺纖維化大鼠氧自由基的影響通過姜黃素對肺纖維化大鼠氧自由基水平影響的研究，探討姜黃素的作用機理。大鼠分組情況同實驗研究1中分組。利用生化法測定大鼠肺組織超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)和一氧化氮合酶(NOS)的含量。結果表明：模型組大鼠體內(nèi)氧自由基含量明顯升高。姜黃素能調節(jié)肺纖維化大鼠體內(nèi)與自由基相關的酶和產(chǎn)物的含量，三個劑量組中，姜黃素高、中劑量組調節(jié)體內(nèi)氧自由基的水平作用明顯。提

6、示：姜黃素能影響肺纖維化大鼠體內(nèi)的氧自由基水平。 2.2姜黃素對肺纖維化大鼠TGF-β1的影響觀察姜黃素對大鼠肺組織TGF-β1的作用，探討其抗肺纖維化的作用機理。用western-blot和免疫組化的方法，研究姜黃素對肺組織TGF-β1的影響。肺組織來源于實驗研究1。結果：姜黃素能降低肺纖維化大鼠肺組織TGF-β1的含量。提示：姜黃素抗肺纖維化的機理之一在于調節(jié)肺組織蛋白中TGF-β1的活性。 2.3姜黃素對肺纖維化大

7、鼠肺組織CTGF的影響觀察姜黃素對TGF-β1下游因子CTGF的調節(jié)作用，以進一步探討其抗肺纖維化的作用機理。用western-blot和免疫組化的方法，研究姜黃素對肺組織TGF-β1的影響。肺組織來源于實驗研究1。結果表明：姜黃素能降低肺纖維化大鼠肺組織蛋白中CTGF的含量。提示：姜黃素抗肺纖維化的機理之一在于調節(jié)肺組織蛋白中CTGF的活性。 2.4姜黃素對肺纖維化大鼠NF-κB和IκBα的影響觀察姜黃素對肺纖維化大鼠肺組織N

8、F-κB和IκBα的影響，探討其抗肺纖維化的作用機理。肺組織來源于實驗研究1。實驗方法采用western-blot和免疫組化的方法，研究肺組織蛋白中NF-κB和IκBα的活性。結果表明：姜黃素能降低肺纖維化大鼠肺組織核蛋白中NF-κB含量，升高胞漿蛋白中IκBα的含量。提示：姜黃素抗肺纖維化作用機理之一在于調節(jié)肺組織蛋白中NF-κB和IκBα的含量。 結論1姜黃素能改善肺纖維化大鼠肺功能，調節(jié)博萊霉素引起肺纖維化大鼠細胞外基質的

9、含量，降低肺組織炎癥和纖維化的程度，而發(fā)揮預防和治療肺纖維化的作用。 2姜黃素抗肺纖維化的作用機理2.1調節(jié)大鼠體內(nèi)氧自由基水平，減輕氧自由基對肺組織結構的損傷。 2.2調節(jié)肺組織蛋白TGF-β1的活性。 2.3調節(jié)肺組織蛋白CTGF的活性。 2.4調節(jié)肺組織蛋白IκBα的活性，進而抑制NF-κB活性。 總之，姜黃素具有防治肺纖維化的作用。其作用機理可能在于通過升高肺組織IκBα的活性，降低NF-