MMP-7，E-cadherin，VEGF的表達與賁門癌生物學行為的關系.pdf

1、 目的：本研究應用免疫組織化學技術，聯(lián)合檢測MMP-7，E-cadherin，VEGF在賁門癌和胃竇癌中的表達，探討它們的內在聯(lián)系及它們與賁門癌生物學行為的關系。 方法：1.采用鏈霉菌抗生物素—過氧化物酶連接(S-P)免疫組織化學染色。染色步驟如下：(1)標本蠟塊4μm連續(xù)切片；(2)二甲苯脫蠟，梯度酒精水化；(3)高壓鍋法以檸檬酸鹽緩沖液中抗原修復，冷卻至室溫；(4)試劑A處理15分鐘以阻斷內源性過氧化物酶活性；(5)切

2、片在試劑B中孵育20分鐘，閉非特異位點；(6)棄血清，加50μl稀釋好的一抗，濕盒內4℃過夜。(7)PBS沖洗，加50μl試劑C，置濕盒內，室溫下20分鐘。(8)加50μl試劑D，室溫下孵育10分鐘。(9)加100μl新配制的DAB溶液，在顯微鏡下監(jiān)控下顯影，終止反應。(10)自來水沖洗，蘇木素核復染5分鐘，鹽酸酒精酚化15秒。(11)梯度酒精脫水干躁，二甲苯透明。(12)中性樹脂固定。 結論：1.賁門癌的淋巴結轉移明顯高于胃竇