組織工程人工骨修復(fù)股骨頭壞死骨缺損的實驗研究.pdf

1、目的：通過體外分離、培養(yǎng)新生家兔成骨細(xì)胞(OBs)，在體外與羥基磷灰石/三磷酸鈣陶瓷復(fù)合載體(HA/β-TCP)復(fù)合培養(yǎng)后，植入股骨頭壞死骨缺損的動物模型體內(nèi)，以觀察組織工程人工骨對股骨頭壞死骨缺損的修復(fù)作用。 方法：植塊法/膠原酶消化法分離、培養(yǎng)新生24小時家兔成骨細(xì)胞，取第三代成骨細(xì)胞與HA/β-TCP在體外復(fù)合培養(yǎng)；14只成年家兔(28髖)用開槽、95％酒精腐蝕法造成雙側(cè)股骨頭壞死骨缺損模型，28髖隨機(jī)分為A組空白對照組(

2、自然修復(fù)組)，B組單純HA/β-TCP植入組，C組組織工程人工骨植入組。即刻植入組織工程化人工骨。術(shù)后4、8、12周作X線、CT檢測、HE染色、測量12周X線片骨缺損面積，原缺損區(qū)新生骨小梁體積(TVB)計量形態(tài)學(xué)分析，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，了解股骨頭骨缺損修復(fù)情況。 結(jié)果：植塊法和膠原酶法分離培養(yǎng)成骨細(xì)胞均獲成功，第三代成骨細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)染色陽性；成骨細(xì)胞與HA/β-TCP在體外復(fù)合后，繼續(xù)增殖、分裂并分泌骨基質(zhì)，掃描電鏡

3、檢查顯示HA/β-TCP表面及孔隙內(nèi)均有大量細(xì)胞生長，并有骨基質(zhì)分泌。 術(shù)后X線及CT檢測：人工骨組4周時見植入人工骨高密度影，周圍有透光區(qū)，與單純材料組無明顯區(qū)別。8周時人工骨影縮小，透光區(qū)影模糊。12周充填區(qū)密度與周圍骨質(zhì)基本一致，看不到骨缺損的透光影。未出現(xiàn)股骨頭塌陷或關(guān)節(jié)間隙狹窄等骨性關(guān)節(jié)炎的表現(xiàn)；空白對照組部分出現(xiàn)股骨頭塌陷、關(guān)節(jié)間隙狹窄。 HE染色組織切片觀察：人工骨組術(shù)后4周缺損區(qū)中部為人工骨，周邊出現(xiàn)反應(yīng)

4、帶，有軟骨性骨痂形成；術(shù)后8周周邊新骨帶明顯增寬，材料漸降解；植入后12周充填區(qū)廣布較成熟的骨小梁，但較正常骨小梁粗、部分呈板層狀或編織狀骨小梁，材料大部分降解。12周骨缺損面積、原缺損區(qū)新生骨小梁體積(TBV)C組與B組(P＜0.05)、A組(P＜0.01)比較，有明顯統(tǒng)計學(xué)差異。隨時間延長，人工骨組TBV增加(P＜0.05)。 結(jié)論：體外分離、培養(yǎng)成骨細(xì)胞，與HA/β-TCP復(fù)合構(gòu)建組織工程化人工骨獲取成功，HA/β-TCP