抗根癌病多花薔薇對(duì)病原菌侵染的生理及分子響應(yīng).pdf

1、本文針對(duì)月季根癌病的抗性資源及抗性機(jī)制不明等問題，從月季根部腫瘤中分離病原菌、篩選抗月季根癌病種質(zhì)資源，并從生理學(xué)與分子生物學(xué)兩個(gè)層面著重探討了多花薔薇的抗病機(jī)理?！　”疚?采用抑制差減雜交(suppressionsubtractivehybridization，SSH)方法，構(gòu)建了根癌土壤桿菌脅迫下多花薔薇無刺4號(hào)增強(qiáng)表達(dá)或抑制表達(dá)的正反向差減cDNA文庫。差示篩選差減cDNA文庫的基礎(chǔ)上，隨機(jī)選取增強(qiáng)表達(dá)的92個(gè)克隆進(jìn)行測(cè)序，去除

2、冗余的cDNA和根癌土壤桿菌的基因片段，共得到53個(gè)單一序列(uniqueESTs)。利用GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行核酸和蛋白質(zhì)同源性比較，多花薔薇無刺4號(hào)受病原菌誘導(dǎo)增強(qiáng)表達(dá)的ESTs功能涉及：細(xì)胞分裂、生長(22個(gè)克隆)；防御、逆境應(yīng)答、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及激素調(diào)節(jié)(11個(gè)克隆)；初生與次生代謝(10個(gè)克隆)。另有10個(gè)基因片段功能未知，可能為新的ESTs。RT-PCR進(jìn)一步分析了9個(gè)差減片段受病原菌誘導(dǎo)表達(dá)情況。結(jié)果顯示，其中有8個(gè)片段明顯受