25二羥維生素D3聯(lián)合塞萊昔布增強(qiáng)阿霉素對乳腺癌細(xì)胞株MCF-ADR的作用及與NF-κB的關(guān)系.pdf

1、目的：研究1,25二羥維生素D3[1a,25-DihydroxyvitaminD3;1,25-D]和塞萊昔布(celecoxib;CELE)影響阿霉素(doxorubicin;ADM)對乳腺癌細(xì)胞株MCF/ADR的作用及其作用機(jī)制與NF-κB的關(guān)系。
　　方法：采用四唑氮藍(lán)比色(MTT)法檢測1,25-D和CELE對MCF/ADR細(xì)胞的作用及ADM的半數(shù)藥物抑制濃度(IC50);采用流式細(xì)胞技術(shù)分析1,25-D和CELE作用于乳腺

2、癌細(xì)胞株MCF/ADR細(xì)胞后,對細(xì)胞凋亡和細(xì)胞內(nèi)ADM累積的影響;羅丹明標(biāo)記抗體檢測1,25-D和CELE對MCF/ADR細(xì)胞膜表面P-糖蛋白表達(dá)的影響;免疫組化SP法檢測1,25-D和CELE作用于MCF/ADR細(xì)胞后NF-κB/p65蛋白和IκBα蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.1,25-D和CELE對MCF/ADR細(xì)胞的作用
　　1,25-D和CELE抑制MCF/ADR細(xì)胞的增殖,且具有時間和濃度依賴性,兩

3、藥聯(lián)合使用時呈現(xiàn)協(xié)同抑制作用。
　　2.1,25-D和CELE增強(qiáng)ADM對MCF/ADR細(xì)胞的作用
　?、?,25-D(50nmol/L)和CELE(25umol/L)作用于MCF/ADR細(xì)胞后,ADM的IC50明顯降低(P<0.01),1,25-D、CELE聯(lián)合用藥組與1,25-D或CELE單藥組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。
　　②1,25-D聯(lián)合CELE和ADM作用72h后MCF/ADR細(xì)胞的早期凋亡率顯著提

4、高,與1,25-D或CELE單藥聯(lián)合ADM組和單用ADM組凋亡率相比差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);
　　③1,25-D和CELE均降低了MCF/ADR細(xì)胞表面P170蛋白的表達(dá),增加了細(xì)胞內(nèi)ADM的濃度,兩藥聯(lián)合作用強(qiáng)于1,25-D或CELE單藥作用(P<0.01)。
　　3、1,25-D聯(lián)合CELE對NF-κB活性的影響
　　免疫組化結(jié)果提示ADM促進(jìn)P65蛋白的表達(dá),抑制IkB-α的表達(dá);與細(xì)胞對照組和AD

5、M組相比,1,25-D聯(lián)合CELE組的p65蛋白表達(dá)水平降低,IκBα的表達(dá)增高,抑制了ADM引起NF-κB的活化(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.1,25-D和CELE抑制MCF/ADR細(xì)胞增殖、促進(jìn)了MCF/ADR細(xì)胞的凋亡,兩者聯(lián)合用藥時較1,25-D或CELE單藥效果更佳。
　　2.1,25-D聯(lián)合CELE和ADM作用于MCF/ADR細(xì)胞后,降低了ADM的IC50和細(xì)胞表面P170蛋白的表達(dá),細(xì)胞內(nèi)ADM