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1、目的:探討腸源性?xún)?nèi)毒素血癥對(duì)大鼠肝肺綜合征(Hepatopulmonarysyndrome,HPS)形成過(guò)程中肺部一氧化氮合酶表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化。 材料與方法:健康雄性Wistar大鼠,體重220-250g,共24只,隨機(jī)分為4組,正常對(duì)照組(control)給予正常飼料和自來(lái)水,模型組以摻入膽固醇的玉米面作飼料,膽固醇占飼料重量的0.5%(前2周的每千克飼料中含有200g豬油),以30%酒精作為其唯一飲料。在實(shí)驗(yàn)第一天脊背皮下注射
2、CCL4原液,按5ml/kg給予,以后每隔3天皮下注射40%CCL4(用玉米油稀釋),按3ml/kg給予,分別于4周末、6周末、8周末處死動(dòng)物,留取肝組織、肺組織標(biāo)本、血標(biāo)本,通過(guò)生化、放免、病理、免疫組化、RT-PCR等方法檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)。 結(jié)果:1.HPS成過(guò)程中所致的腸源性?xún)?nèi)毒素血癥的動(dòng)態(tài)觀(guān)察結(jié)果在HPS動(dòng)物模型復(fù)制4周起,血漿內(nèi)毒素水平顯著升高,6周達(dá)到高峰,8周有所下降,但仍顯著高于正常水平。結(jié)果提示在HPS形成的過(guò)程中
3、伴隨存在IETM。 2.HPS形成過(guò)程中肺部一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)的動(dòng)態(tài)觀(guān)察結(jié)果2.1肺組織誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthaseiNOS)和內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase,eNOS)蛋白表達(dá)的動(dòng)態(tài)觀(guān)察結(jié)果,在HPS形成過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)第4周肺部iNOS和eNOS的蛋白表達(dá)顯著增高,在6周和8周時(shí)間點(diǎn)呈明顯
4、的持續(xù)上升趨勢(shì); 2.2肺組織iNOS和eNOS基因表達(dá)的動(dòng)態(tài)觀(guān)察結(jié)果,在HPS形成過(guò)程中肺部iNOS的基因表達(dá)逐漸增加,4周末即有升高,6周末繼續(xù)升高,到8周末達(dá)到高峰;eNOS的基因表達(dá)4周起也有增高,到8周達(dá)到高峰,兩者表達(dá)具有相似的規(guī)律。 3.TNF-α和ET-1對(duì)HPS形成過(guò)程中肺部iNOS和eNOS表達(dá)影響的結(jié)果TNF-α4周時(shí)顯著升高(與對(duì)照組比較p<0.05),6周與4周比有所下降,但仍顯著高于正常對(duì)照組
5、,8周升高并達(dá)到最高峰;ET-14周顯著下降(p<0.05),6周與4周比有所升高,但仍低于對(duì)照組,8周繼續(xù)升高達(dá)到最高峰。TNF-α水平與iNOS、eNOS蛋白和基因之間具有顯著相關(guān)性。 結(jié)論:1.HPS形成過(guò)程中,肝臟功能改變是肺功能變化的基礎(chǔ);2.HPS形成過(guò)程中伴隨發(fā)生的IETM,可能是肝功能障礙導(dǎo)致HPS自發(fā)形成的關(guān)鍵;3.HPS形成過(guò)程中,IETM可能對(duì)肺部eNOS和iNOS的表達(dá)發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用;4.IETM對(duì)肺
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