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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:1.分析 HIV/AIDS患者外周血中Th1、Th2和Tfh細(xì)胞以及它們相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子T-bet mRNA、GATA3 mRNA、Bcl-6 mRNA的變化。
2.通過分析Tfh細(xì)胞與CD4+T細(xì)胞的相關(guān)性,初步探討 Tfh細(xì)胞與HIV/AIDS疾病進(jìn)展的關(guān)系。
方法:篩選2014年4月至11月期間河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院艾滋病研究中心經(jīng)HIV抗體確證實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性者61例,根據(jù)CD4+T細(xì)胞數(shù)將HIV/AIDS患者
2、分為A(CD4≤200 cell/μl)、B(200<CD4<500 cell/μl)、C(CD4≥500 cell/μl)三組,同期選取20例來自體檢中心的健康人作為健康對(duì)照組,采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群(CD3+T細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞、CD3-CD16+CD56+細(xì)胞、CD3-CD19+細(xì)胞),Th1(CD4+IFN-γ+),Th2(CD4+IL4+)和Tfh細(xì)胞(CD4+CXCR5+I
3、COS+)的百分比。RT-PCR技術(shù)檢測(cè)其外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中轉(zhuǎn)錄因子T-bet mRNA、GATA3 mRNA和Bcl-6 mRNA的相對(duì)表達(dá)量。分析Tfh細(xì)胞與Bcl-6 mRNA和B細(xì)胞之間的相關(guān)性,Tfh細(xì)胞與CD4+T細(xì)胞的相關(guān)性。
結(jié)果:1.淋巴細(xì)胞亞群分析:HIV/AIDS各組患者CD3+CD4+T細(xì)胞百分比明顯低于健康對(duì)照組(P<0.05)。CD3+CD8+T細(xì)胞比健康對(duì)照組高(P<0.05)。四組C
4、D3+T細(xì)胞、B(CD3-CD19+)細(xì)胞和NK(CD3-CD16+CD56+)細(xì)胞比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2. Th1/Th2/Tfh細(xì)胞及其相應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子分析:A組(CD4<200)患者Th1占CD4+T細(xì)胞百分比(13.56±8.47)明顯高于其它三組(P<0.05),其余三組 Th1比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。Th1細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子T-bet mRNA相對(duì)表達(dá)量A組(11.06±4.87),B組(10
5、.21±3.83),C組(7.86±3.95)均高于健康對(duì)照組(P<0.05);Th2細(xì)胞在四組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),其轉(zhuǎn)錄因子GATA3 mRNA相對(duì)表達(dá)量 A組(1.95±0.45),B組(2.49±0.91),C組(2.64±0.93)均高于健康對(duì)照組(P<0.05);A組Tfh細(xì)胞(CD4+CXCR5+ICOS+)百分比(5.27±2.34)高于C組(1.58±1.12)和健康對(duì)照組(0.80±0.49)(P<
6、0.05),其轉(zhuǎn)錄因子Bcl-6 mRNA相對(duì)表達(dá)量 A組(2.56±0.61),B組(2.30±0.64),C組(2.02±0.49)均高于健康對(duì)照組(P<0.05)。
3.不同的Tfh樣細(xì)胞群與Bcl-6 mRNA相關(guān)性:CD4+CXCR5+ICOS+T細(xì)胞與Bcl-6 mRNA正相關(guān)(r=0.559,P=0.000);CD4+CXCR5+T細(xì)胞與 Bcl-6 mRNA正相關(guān)(r=0.275,P=0.032)。
7、4.不同的Tfh樣細(xì)胞群與B(CD19+)細(xì)胞相關(guān)性:不同的Tfh細(xì)胞均與B細(xì)胞無關(guān)聯(lián)(r=-0.102,P=0.363;r=-0.043,P=0.706)。
5.不同的Tfh樣細(xì)胞群與CD4+T細(xì)胞相關(guān)性:CD4+CXCR5+ICOS+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)負(fù)相關(guān)(r=-0.749,P=0.000);CD4+CXCR5+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞負(fù)相關(guān)(r=-0.731,P=0.000)。
結(jié)論:1. HIV/AI
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