脂質(zhì)體介導(dǎo)法轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白基因雞的技術(shù)路線研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文脂質(zhì)體介導(dǎo)法轉(zhuǎn)綠色熒光蛋白基因雞的技術(shù)路線研究姓名：劉瓊霞申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：臨床獸醫(yī)指導(dǎo)教師：陳鐵橋燕海峰20050501TheStudyofTechnologyRouteofTransgenicChickenProducingwithLiposomemediatedGreenF!uorescentProteinGeneAbstractThepotentialofusingtransgenicanimals

2、forthesynthesisoftherapeuticproteinswassuggestedovertwentyyearsago.Considerableprogresshasbeenmadeindevelopingmethodsfortheproductionoftransgenicanimalsandspecificallyintheexpressionoftherapeuticproteinsinthemammarygland

3、sofcowssheepandgoats.Increaseddemandfortheproductionofhumanbiopharmaceuticalsintransgenicorganismshasledtoanintensiveeforttodevelopthehenasabioreactorproducingexogenousproteinsineggwhiteviatransgenesis.Todatehoweverrobus

4、tmethodsfortransgenicmodificationoftheaviangenomehavelaggedbehindinmammaliansystems.Thepositivefeaturesassociatedwiththeuseof比.chickenintermsofcostspeedofdevelopmentofaproductionflockandpotentiallyappropriateglycosylatio

5、noftargetproteinshaveledtosignificantadvancesintransgenicchickenmodelsinthepastfewyears.Sowecarryoutthisrearch.Researcho坷ective:ThisstudywastotransferandexpressforeigngenesundercontroloftheovalbuminpromoterintheBCs.Wehav

6、eusedplasmidDNA(pEGFPC1)incombinationwithcationicliposomestotransfectchickenBCs.ToobtainhighereficiencyinliposomemediatedgenetransferintochickenBCscells.Amodelwasdevelopedtoexplainthebasisofanioniclipoplexuptakeandtransf

7、ectionefficacyResearchMethods:ThezygotelaidbyWhiteLe沙ornisusedasexprementalmaterials.InordertointroduceexogenousDNAintogonadsofchickembryosstageXblastodermsoffreshlylaidandunincubatedeggsweretransfectedbylipofectioninviv

8、o.ChickenBCswereisolatedinvitroandcultured、TransfectioneficienciesatdiferentdosesofDNA(1234Sug)liposome(6ul)werecalculatedunderfluorescentmicroscopyusingGFP(GreenFluorescentProtein)asareportergene.TheliposomeDNAcomplex(I

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