西格列汀對2型糖尿病大鼠血清及組織中chemerin水平的影響.pdf

1、目的：研究西格列汀對2型糖尿病(T2DM)大鼠各代謝指標及脂肪因子chemerin水平的影響及其可能的機制，并探討脂肪因子chemerin與T2DM的關系。
　　方法：
　　1.選取年齡4周且體重為(100±20)g的普通級雄性SD大鼠，共35只，在室溫為22℃及濕度在55％左右的環(huán)境下不限制攝食及飲水喂養(yǎng)。
　　2.造模：將大鼠分為普通飼料喂養(yǎng)組（NC組，n=10）及高脂飼料喂養(yǎng)組（HF組，n=25），12周后一次性

2、腹腔注射鏈脲佐菌素 STZ（用之前溶解在 PH=4.5的0.1 mmol/L檸檬酸緩沖液中）35 mg/kg于高脂大鼠，7天后測定大鼠空腹血糖，將空腹血糖11.1 mmol/L設定為臨界點，超過該臨界點的大鼠認為T2DM模型造模成功。3.干預方式：將20只造模成功的大鼠隨機分為2組：T2DM對照組（T2DM組，n=10）：灌胃2ml生理鹽水，西格列汀組（SITA組，n=10）：灌胃給予西格列汀10mg/kg/d，溶于2 ml羥甲基淀粉酶

3、中，每日灌胃時間于早9點，持續(xù)6周，繼續(xù)予以普通飼料喂養(yǎng)。
　　4.留取標本：干預前禁食12 h后內眥靜脈取血2 ml，干預6周后禁食12 h腹主動脈取血3 ml，血標本靜止15 min后，3200 r/min離心10 min，留取血清置于-80℃冰箱保存。并在冰上操作取出腎周脂肪、肝臟組織及股側肌肉組織，置于液氮罐中以備提取蛋白質。
　　5.檢測指標及方法：干預前后測體重(BW)，ELISA法測定血清 chemerin、胰

4、島素(FINS)，血糖儀測定空腹血糖(FBG)，酶法及選擇性沉淀法測定血脂包括總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)，通過公式計算胰島素抵抗指數(HOMO-IR)與胰島β細胞功能指數(HOMO-β)，Western blot法檢測大鼠腎周脂肪、肝臟和肌肉組織chemerin蛋白表達水平。
　　結果：
　　1．西格列汀干預前：T2DM大鼠的血清chemerin、BW、FBG、FINS、TC、TG、LDL、H

5、OMO-IR與NC組比較均增高，HOMO-β降低，T2DM組大鼠腎周脂肪、肝臟及肌肉組織的chemerin蛋白表達量增加（P<0.05）
　　2.西格列汀干預后，與T2DM組比較，SITA組BW、FBG、FINS、TC、TG、LDL、HOMO-IR及血清chemerin水平降低，HOMO-β升高（P<0.05）。SITA組大鼠腎周脂肪、肝臟組織的chemerin蛋白表達量減少（P<0.05），肌肉組織中chemerin表達量無變化

6、。
　　3.相關性分析：西格列汀干預前血清chemerin與BW、FBG、FINS、HOMO-IR、TG、TC及LDL呈正相關，干預后血清chemerin與BW、FINS、TG及HOMO-IR呈正相關，血清中chemerin的含量與腎周脂肪中該蛋白的表達量呈正相關（r=0.79,P<0.05）。
　　4.多元回歸分析：顯示西格列汀干預前后TG、FINS及HOMO-IR始終與chemerin獨立相關。血清chemerin水平與