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1、背景與目的:血管成形術(shù)后再狹窄是影響其遠(yuǎn)期療效的最主要問題。眾多研究顯示其發(fā)生由內(nèi)膜增生和血管重塑共同決定,血管平滑肌細(xì)胞的異常激活、遷移與增殖和細(xì)胞外基質(zhì)代謝異常相互作用,促使再狹窄發(fā)生。膠原蛋白的合成與降解失衡是導(dǎo)致血管重塑的重要原因。本課題建立在兔髂動(dòng)脈球囊損傷模型的基礎(chǔ)上,模擬再狹窄的病理變化,應(yīng)用粉防己堿(Tetrandrine,TET)進(jìn)行干預(yù),研究球囊損傷后粉防己堿對(duì)血管平滑肌增殖以及動(dòng)脈壁膠原含量的影響,探討粉防己堿預(yù)防
2、再狹窄的可能機(jī)制。
方法:健康雄性新西蘭兔24只,隨機(jī)分為粉防己堿干預(yù)組、對(duì)照組和假手術(shù)組。TET組及對(duì)照組均以球囊損傷髂動(dòng)脈內(nèi)膜,TET組于術(shù)前3天至術(shù)后28天予粉防己堿腹腔注射(45mg·kg-1·d-1),假手術(shù)組僅結(jié)扎一側(cè)髂動(dòng)脈。手術(shù)4周后處死動(dòng)物,對(duì)球囊損傷部位動(dòng)脈段進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)檢查,通過計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)測(cè)定血管管腔面積、內(nèi)膜面積、內(nèi)膜平均厚度和中膜面積,計(jì)算內(nèi)膜/中膜面積比;羥脯氨酸測(cè)定法間接計(jì)算動(dòng)脈膠原含量;
3、通過免疫組化方法檢測(cè)細(xì)胞外基質(zhì)主要成分Ⅰ型膠原蛋白。測(cè)量實(shí)驗(yàn)前后動(dòng)物的體重。
結(jié)果:⑴球囊損傷后4周,兔血管壁明顯增厚,內(nèi)膜增生尤為顯著,VSMC明顯增多,細(xì)胞排列紊亂,Masson's染色可見VSMC增殖和以膠原蛋白為主的ECM大量沉積;⑵與對(duì)照組相比,粉防己堿干預(yù)組內(nèi)膜面積(0.31±0.11mm2 vs0.23±0.07mm2 at28days,P<0.01)、內(nèi)膜/中膜比(37.13±2.97%vs25.77±3.74
4、%at28 days,P<0.01)均明顯減少;⑶粉防己堿干預(yù)組膠原面積/管壁面積(54.27±9.78%vs29.32±7.33% at28days,P<0.01)、動(dòng)脈膠原含量(313.6±25.3vs231.2±18.9at28days,P<0.05)均較對(duì)照組減少;⑷Ⅰ型膠原免疫組化染色:對(duì)照組及粉防己堿干預(yù)組陽性表達(dá)指數(shù)差異有顯著性(31.2±4.7vs23.5±5.2,P<0.01);⑸術(shù)前及術(shù)后3組動(dòng)物體重差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
5、。粉防己堿干預(yù)組無明顯不良反應(yīng)。
結(jié)論:⑴球囊血管損傷后,VSMC異常增殖以及細(xì)胞外基質(zhì)合成增多共同促成了血管狹窄。球囊損傷第28天,膠原含量、Ⅰ型膠原表達(dá)顯著增加,在血管狹窄中起著重要作用。⑵粉防己堿干預(yù)組術(shù)后28天內(nèi)膜面積、內(nèi)膜/中膜面積比、膠原含量以及Ⅰ型膠原表達(dá)較對(duì)照組減少,說明粉防己堿(45mg·kg-1·d-1)能有效抑制兔髂動(dòng)脈球囊損傷術(shù)后VSMC增殖和膠原合成,減輕術(shù)后新生內(nèi)膜增生程度。⑶粉防己堿(45mg·k
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