苦瓜蛋白對新西蘭兔頸動脈球囊拉傷-套環(huán)后狹窄的影響.pdf

1、目的:
　　血管內(nèi)膜的炎癥損傷和血管幾何形狀的改變都可以造成動脈管腔狹窄,但是兩種狹窄的形成機(jī)制可能是不相同的。本課題擬在動物身上復(fù)制出頸總動脈球囊損傷和頸總動脈套環(huán)這兩種經(jīng)典的血管狹窄模型,以苦瓜蛋白進(jìn)行干預(yù),在動物水平上觀察苦瓜蛋白對血管狹窄的影響,并從炎性因子、平滑肌細(xì)胞增殖與調(diào)亡等方面初步探討其作用機(jī)制,為把苦瓜蛋白運(yùn)用于血管再狹窄的預(yù)防和治療進(jìn)行前期基礎(chǔ)研究。
　　方法:
　　1.動物實驗一:建立頸總動脈球囊

2、損傷后血管狹窄的動物模型。將新西蘭白兔40只隨機(jī)分為四組(正常對照組、假手術(shù)組、球囊拉傷組、球囊拉傷+苦瓜蛋白組),除正常對照組外,其余三組高脂飲食喂養(yǎng),術(shù)后8周耳緣靜脈取血,測血脂水平、NO與ET含量,損傷段頸動脈做病理切片,HE染色,行病理學(xué)形態(tài)學(xué)檢查,采用圖像分析系統(tǒng)(HMIAS2000軟件)比較不同組間動脈的內(nèi)、中膜厚度和管腔面積以及管腔平均狹窄程度;采用免疫組織化學(xué)方法來觀察動脈壁中的P53與NF-κB、TNF-α與、PCNA

3、蛋白表達(dá),并做定量分析(統(tǒng)計陽性細(xì)胞率)。
　　2.動物實驗二:建立頸總動脈套環(huán)后血管狹窄的動物模型。將新西蘭白兔20只隨機(jī)分為三組(正常對照組、動脈套環(huán)組、動脈套環(huán)+苦瓜蛋白組),除正常對照組外,其余二組高脂飲食喂養(yǎng)4周后處死,取靜脈血做血脂、NO與ET含量的檢測,套環(huán)段頸動脈做病理切片,HE染色,病理學(xué)形態(tài)學(xué)檢查,采用圖像分析系統(tǒng)(HMIAS2000軟件)比較不同組間動脈的內(nèi)、中膜的厚度和管腔面積以及管腔最大狹窄程度;免疫組織

4、化學(xué)方法分析動脈壁中的P53與NF-κB、TNF-α、PCNA蛋白表達(dá),并做定量分析(統(tǒng)計陽性細(xì)胞率)。
　　結(jié)果:
　　病理形態(tài)學(xué)檢查的結(jié)果顯示:1.球囊拉傷組頸總動脈管腔面積減少,內(nèi)膜增厚,有大量的泡沫細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞增生,管腔明顯狹窄,而球囊損傷+苦瓜蛋白組泡沫細(xì)胞少見,其內(nèi)膜主要是平滑肌細(xì)胞;管腔狹窄程度明顯減輕。2.頸動脈套環(huán)組頸總動脈管腔顯著減少,內(nèi)膜明顯增厚,內(nèi)含有泡沫細(xì)以及有大量平滑肌細(xì)胞增生,發(fā)生了明顯的血

5、管重塑,動脈套環(huán)+苦瓜蛋白組也有泡沫細(xì)胞生成,內(nèi)膜同時顯著增生,管腔狹窄程度雖減輕,但與套環(huán)組相比沒有明顯差異性。
　　免疫組化觀察到:1.球囊拉傷組頸總動脈管壁NF-κB、TNF-α、PCNA蛋白表達(dá)增加,而P53蛋白表達(dá)減少;而球囊損傷+苦瓜蛋白組頸總動脈管壁TNF-α、NF-κB、PCNA蛋白表達(dá)減少,而P53表達(dá)增加。2.頸動脈套環(huán)組和動脈套環(huán)+苦瓜蛋白組的頸總動脈管壁TNF-α、NF-κB、PCNA蛋白表達(dá)差異沒有顯著性