癌基因c-fos在三氧化二砷作用于腺樣囊性癌ACC-2細胞中的研究.pdf

1、目的:通過細胞培養(yǎng)觀察三氧化二砷(arsenic trioxide，As2O3)對腺樣囊性癌ACC-2細胞的生長作用情況及誘導細胞凋亡的作用，并檢測細胞內c-fos表達量的變化，從而對As2O3抑制ACC-2細胞生長的作用機制進行探討，為As2O3應用于臨床提供理論依據(jù)。
　　方法:(1)用不同濃度的As2O3分別作用于ACC-2細胞24h、48h及72h，于顯微鏡下觀察ACC-2細胞的形態(tài)變化及生長情況;(2)用RT-PCR法檢

2、測不同的藥物濃度處理ACC-2細胞24h及48h后c-fos基因在mRNA水平上的表達變化情況;(3)免疫組化法觀察藥物作用前后c-fos蛋白表達量的變化。采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包處理、分析數(shù)據(jù)，檢驗水準為a=0.05。
　　結果:(1)As2O3可抑制ACC-2細胞的生長，隨著藥物濃度的升高及作用時間的延長，細胞的抑制作用加強，顯微鏡下觀察可見細胞變小變圓，并有空泡樣變，貼壁細胞減少，懸浮細胞增多，部分細胞發(fā)生壞死及凋亡;

3、(2) RT-PCR結果表明c-fos mRNA在ACC-2細胞的表達量高，而隨著As2O3作用濃度的增加和作用時間的延長，其表達量明顯下降，并具有時間和劑量依賴性，在6-mol/L作用48h時表達量最低，差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.00);(3)免疫組化檢測結果示c-fos蛋白表達于細胞核，胞漿不著色，胞核呈棕黃色或褐色，c-fos蛋白在ACC-2細胞中呈高表達，As2O3作用于ACC-2細胞后，其表達量降低，并具有時間劑量依賴關系，