三氧化二砷對腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞p53基因的表達(dá)的影響.pdf

1、三氧化二砷對腺樣囊性癌A C C - 2 細(xì)胞0 5 3 基因表達(dá)的影響摘要目的研究三氧化二砷( a r s e n i ct r i o x i d e ，A s 2 0 3 ) 對腺樣囊性癌( a d e n o i d c y s t i cc a r c i n o m a ，A C C ) 細(xì)胞株A C C 一2 細(xì)胞p 5 3 基因表達(dá)的影響，探討其誘導(dǎo)腺樣囊性癌細(xì)胞凋亡可能的分子機(jī)制。方法體外培養(yǎng)腺樣囊性癌A C C -

2、2 細(xì)胞，給予指數(shù)生長期的細(xì)胞不同濃度( 1 ．0 、2 ．0 、4 ．0 、8 ．0um o l ／L ) 的A s 。0 。溶液和R P M I - 1 6 4 0 培養(yǎng)液作為實(shí)驗(yàn)組和對照組。給藥后繼續(xù)培養(yǎng)2 4 h 、4 8 h ，觀察不同濃度A s 。0 。對腺樣囊性癌A C C - 2 細(xì)胞的生長抑制作用，應(yīng)用免疫組化和R T —P C R 檢測p 5 3 蛋白和基因的表達(dá)變化。結(jié)果1 ．A s 。0 。對腺樣囊性癌A C C

3、 - 2 細(xì)胞生長的抑制作用與時(shí)間、劑量相關(guān)。A s ：O 。處理2 4 h 后A C C - 2 細(xì)胞形態(tài)無明顯變化，處理4 8 h 后A C C - 2 細(xì)胞縮小變圓、細(xì)胞間隙增大、細(xì)胞核分裂相減少，且抑制作用隨濃度的增加而增大。2 ．腺樣囊腺癌A C C - 2 細(xì)胞p 5 3 蛋白在各組中均呈陽性表達(dá)，不同濃度A s 。0 。處理p 5 3 蛋白表達(dá)量差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( PO ．0 5 )外，其余不同濃度組兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義( P < O ．0 5 ) 。3 ．腺樣囊性癌A C C - 2 細(xì)胞p 5 3 m R N A 第1 2 3 位點(diǎn)存在C —A 的點(diǎn)突變，不同濃度、處理時(shí)間測序結(jié)果相同。不同濃度、處理時(shí)間p 5 3m R N A 表達(dá)量差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < O ．0 1 ) ，不同濃度組兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < O ．0 5 ) 。結(jié)論三氧化二砷能夠下調(diào)腺樣囊性癌A C C - 2 細(xì)胞中突變型p 5 3m

5、R N A 及蛋白的表達(dá)，可能是三氧化二砷誘導(dǎo)腺樣囊性癌A C C - 2 細(xì)胞凋亡的機(jī)制。碩士研究生：高萌( 眼科)導(dǎo)師：姜濤副主任醫(yī)師關(guān)鍵詞：三氧化二砷，腺樣囊性癌，p 5 3 基因，凋亡目錄引言????????????????????????????????????????1第l 章材料和方法????????????????????????·31 ．1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器????????????????????????31

6、．2 實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????????一51 ．2 ．1 A C C 一2 細(xì)胞的培養(yǎng)??????????????????????·51 ．2 ．2 免疫組化檢測p 5 3 蛋白的表達(dá)?????????????????一51 ．2 ．3 R T - P C R 檢測p 5 3m R N A 的表達(dá)??????????????????61 ．2 ．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析????????????????????

7、?????9第2 章結(jié)果??????????????????????????一1 02 ．1 A C C - 2 細(xì)胞形態(tài)變化??????????????????????1 02 ．2 免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果??????????????????????一1 02 ．3 R T - P C R 實(shí)驗(yàn)結(jié)果?????????????????????????．．1 1第3 章討論??????????????????????????一1 3結(jié)論????

8、???????????????????????????????????·1 5參考文獻(xiàn)????????????????????????????1 6綜述???????????????????????????????????????‘2 1綜述參考文獻(xiàn)??????????????????????????2 8攻讀學(xué)位期間的研究成果?????????????????????一3 6附錄???????????????????????