中國山楂果實(shí)中生理活性成分的HPLC分析研究.pdf

1、山楂是一種重要的藥食兩用植物資源,在中國種植栽培面積廣闊,產(chǎn)量可觀.藥理研究表明,山楂具有多種重要的生理活性,以往研究表明,這些生理活性與山楂中所含的黃酮、前花青素、酚酸以及三萜酸等活性成分有關(guān).該研究采用國產(chǎn)高效液相色譜儀建立了一套分析山楂果實(shí)中這些成分的HPLC分析方法,并用這種方法對中國8個(gè)省市的37個(gè)有代表性的山楂品種的綠原酸、表兒茶素、前花青素B2、B5、Cl、金絲桃苷、Isoquercitrin、熊果酸和齊墩果酸等主要活性成

2、分進(jìn)行了分析,同時(shí)還考察了果實(shí)生長期這些成分的含量變化.所使用的高效液相色儀為大連依利特有限公司生產(chǎn),由兩臺P200Ⅱ高壓恒流泵、UV200Ⅱ紫外可變波長檢測器以及Echrom98色譜工作站等部分組成.多酚分析的色譜條件為:色譜柱:HYPERSIL BDS C<,18>分析柱(200mm ×4.6mm ID,5μm);流動相A:20％甲醇(磷酸調(diào)pH=3.20);B:30%乙腈(pH=3.20),梯度程序(B%/min):10/0,10

3、/6,30/13,60/22,100/27,100/32,10/35;流速:0.6ml/min;溫度:室溫;檢測波長:280nm.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各主要活性成分分離較好,各組分回歸方程的相關(guān)系數(shù)r為0.9991~0.9999,最低檢出限為2.51~35.56ng,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD<5.0%,回收率在93.9%~105.8%,35min完成一次分析.熊果酸和齊墩果酸的色譜分析條件為:色譜柱:HYPERSIL BDS C<,18>分析柱(20

4、0mm ×4.6mm ID,5μm);流動相:甲醇-水=90:10(pH=3.0);流速:0.6ml/min;溫度:室溫;檢測波長:210nm.熊果酸和齊墩果酸回歸方程的相關(guān)系數(shù)分別為0.9999,0.9997;最低檢限:2.80ng,2.8lng;回收率:98.33%,98.69%.這些方法具有操作簡單,快速準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn),可作為山楂生藥、提取物、制劑以及各種加工產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制和分析檢測方法.含量分析結(jié)果顯示,中國山楂果實(shí)中的黃酮類物質(zhì)

5、主要為金絲桃苷和Isoquercitrin兩種,含量一般不超過100mg/kg;三萜酸類物質(zhì)中以熊果酸含量較高,平均為952mg/kg;而前花青素類物質(zhì)的平均含量達(dá)到4000mg/kg,可以認(rèn)為是山楂果實(shí)活性物質(zhì)的代表性成分;不同品種之間活性成分含量差異顯著,各種成分含量的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均在30%以上,反映了中國山楂種質(zhì)資源的多樣性;同一品種山楂中各種活性成分的含量之間具有相關(guān)性.另外發(fā)現(xiàn)山楂果實(shí)中活性成分含量隨地理緯度的降低多酚含量有升