山楂中主要成分HPLC測(cè)定方法的研究.pdf

1、山楂作為一種重要的藥用食用植物資源，在我國(guó)有大量的種植栽培面積，產(chǎn)量十分可觀。通過(guò)藥理學(xué)研究表明，山楂含有多種重要的生理活性成分，這些生理活性成分與山楂中所含的前花青素、黃酮、酚酸、三萜及有機(jī)酸等有關(guān)。本文采用高效液相色譜儀建立了一套山楂中主要成分的HPLC分析方法，并用此方法對(duì)山楂中的山楂酸、熊果酸、齊墩果酸、綠原酸、異綠原酸、前花青素B2、B5、C(1)、表兒茶素、金絲桃苷、異槲皮素、檸檬酸和草酸等主要活性成分進(jìn)行了分析。所使用的高

2、效液相色譜儀為大連依利特有限公司生產(chǎn)，由兩臺(tái)P230Ⅱ高壓恒流泵、UV230Ⅱ紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器以及EC2006色譜工作站等部分組成。
　　山楂中三萜的測(cè)定色譜條件:色譜柱∶Thermo HypersiLC18 ODS(250 nm×4.6 mm，5μm);流動(dòng)相∶乙腈-甲醇-水（含1 g·L-1磷酸，3 mg·L-1六次甲基四胺）(60∶25∶15);流速:0.8 mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng):210 nm;柱溫:30℃;進(jìn)樣量:

3、10μL。山楂酸、熊果酸和齊墩果酸回歸方程的相關(guān)系數(shù)分別為0.9996，0.9998，0.9997;線性范圍:0.051～0.256μg，0.082～0.431μg，0.022～0.106μg;回收率:1.09％，0.96％，1.08％。山楂中黃酮、前花青素、酚酸活性成分的測(cè)定色譜條件∶色譜柱∶Thermo HypersiLC18 ODS(250 nm×4.6 mm，5μm);流動(dòng)相∶A∶500μL/L的磷酸水溶液;B∶甲醇/乙腈=30

4、∶70，含500μL/L的磷酸;梯度洗脫程序:(min/B％)0/14，8/14，15/18，25/18，36/50，40/50，40/14∶檢測(cè)波長(zhǎng)∶280 nm(0～8 min),340 nm(8-36 min),280 nm(36～40 min);流速:0.8 mL· min-1;溫度:30℃;進(jìn)樣量:10 uL。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各活性成分的分離效果較好，各組分回歸方程的相關(guān)系數(shù)r為0.9991～0.9998，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD＜5.

5、0％，回收率在97.09％～104.55％，40 min完成一次分析。山楂中有機(jī)酸活性成分的測(cè)定色譜條件:色譜柱∶ Thermo HypersiLC18 ODS(250 nm×4.6 mm，5μm);流動(dòng)相3％甲醇-40 mmol/L KH2PO4-H3PO4(pH=2.54)，檢測(cè)波長(zhǎng);215姍;流速:0.8mL·min-1;溫度:30℃;進(jìn)樣量:10 uL。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各活性成分的分離效果較好，各組分回歸方程的相關(guān)系數(shù)r為0.994

6、5～0.9968，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD＜5.0％，回收率在88.96％～107.14％。以上方法操作簡(jiǎn)單、快速和準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，可以作為山楂生藥、山楂提取物、山楂制劑以及各種加工產(chǎn)品的質(zhì)量控制和分析檢測(cè)。
　　分析結(jié)果表明，山楂中的三萜類物質(zhì)中以熊果酸含量較高，酚酸類物質(zhì)主要為金絲桃苷和異槲皮素兩種，前花青素類物質(zhì)的含量比較高可以認(rèn)為是山楂果實(shí)活性物質(zhì)的代表性成分;有機(jī)酸類物質(zhì)中以檸檬酸含量較高。本文的創(chuàng)新點(diǎn)一是實(shí)現(xiàn)了山楂酸、熊果酸與齊