化濁解毒方對(duì)大鼠酒精性肝病的防治作用及機(jī)制探討.pdf

1、目的：酒精性肝病（alcoholic liver disease，ALD）是由于長(zhǎng)期大量飲酒導(dǎo)致的肝臟疾病。近年來(lái)我國(guó)由酒精所致肝損害的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，酒精已成為繼病毒性肝炎后導(dǎo)致肝損害的第二大病因。因此對(duì)ALD的研究日益引起廣泛的關(guān)注。如何防治ALD已成為醫(yī)學(xué)上的一個(gè)重大課題。本課題旨在通過(guò)觀(guān)察化濁解毒方對(duì)酒精性肝病大鼠血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）、腫瘤壞死因子（TNF-a）

2、、內(nèi)毒素（LPS）含量的影響，探討化濁解毒方治療ALD可能的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：采用隨機(jī)數(shù)字表法，將40只成熟SD雄性大鼠隨機(jī)分為5組：正常組（即空白對(duì)照組）、模型組、凱西萊組、化濁解毒方高劑量組（簡(jiǎn)稱(chēng)中藥高劑量組）、化濁解毒方低劑量組（簡(jiǎn)稱(chēng)中藥低劑量組），每組8只。正常組每日灌胃生理鹽水4ml，分兩次灌胃，持續(xù)12周。其余四組給予紅星牌二鍋頭酒灌胃，起始濃度為30％，酒精攝入量約為5g·kg-1·d

3、-1，以后每周白酒濃度增加5％，酒精攝入量增加0.5g·kg-1，濃度最高達(dá)50％，酒精攝入量達(dá)8g·kg-1·d-1。每天分兩次灌胃，持續(xù)12周。造模第8周末，中藥高劑量組按48.9g生藥/kg體重每日灌胃化濁解毒方1次；中藥低劑量組按16.3g生藥/kg體重每日灌胃化濁解毒方1次；凱西萊組按50mg/kg體重每日灌凱西來(lái)片1次，均持續(xù)四周。末次給藥后禁食24小時(shí)，用2％戊巴比妥鈉4mg/kg行腹腔注射麻醉。自大鼠股動(dòng)脈放血3～5ml

4、。做以下指標(biāo)測(cè)定：肝功能、總膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）、內(nèi)毒素（LPS）、腫瘤壞死因子（TNF-α）的測(cè)定。同時(shí)迅速解剖出肝臟，于肝右葉中部快速切取一塊肝組織用10％甲醛固定。用于肝組織普通病理觀(guān)察。
　　 結(jié)果：（1）大鼠體重和肝指數(shù)變化：灌酒8周以后，模型組、中藥高劑量組、中藥低劑量組大鼠體重較正常組明顯降低（P<0.05）。治療后，中藥

5、高劑量組、中藥低劑量組、凱西萊組大鼠體重增加，肝指數(shù)降低，與模型組比較差異顯著（P<0.05）。與凱西萊組比較，中藥高劑量組大鼠體重和肝指數(shù)有顯著性差異（P<0.05）。中藥高劑量組在增加體重和降低肝指數(shù)方面優(yōu)于中藥低劑量組（P<0.05）。中藥低劑量組與凱西萊組在體重和肝指數(shù)方面無(wú)明顯差別（P>0.05）。（2）血脂水平測(cè)定：與正常組比較，模型組大鼠血清TG、CHO水平均明顯升高（TG：1.48±0.11 VS0.54±0.13 P<

6、0.01；CHO：2.04±0.34 VS1.19±0.23 P<0.01）。中藥高劑量組、凱西萊組大鼠血清TG、CHO水平較模型組明顯降低（P<0.05，P<0.01）。中藥低劑量組大鼠血清TG、CHO水平與模型組相比無(wú)顯著性差異（P>0.05），但有下降趨勢(shì)。與凱西萊組比較，中藥高劑量組大鼠血清TG、CHO含量顯著降低（TG：0.76±0.21 VS1.04±0.12 P<0.05；CHO：1.34±0.35 VS1.74±0.14

7、 P<0.05）。（3）肝功能測(cè)定：與正常組比較，模型組大鼠血清AST、ALT、AKP、γ-GT均顯著增高（ALT：109.63±33.32 VS55.25±10.25，P<0.01；AST：295.13±16.18VS93.75±15.85，P<0.01：ALP：230.13+33.04VS99.57±29.31，P<0.01；γ-GT：17.63±2.39VS10.25±1.48，P<0.01）。與模型組相比，中藥高劑量組血清ALT

8、、AST、γ-GT、AKP含量明顯降低（P<0.01）。凱西萊組大鼠血清AKP含量較模型組無(wú)明顯差別（P>0.05），ALT、AST、γ-GT含量均較模型組顯著降低（P<0.05）。中藥低劑量大鼠血清ALT、γ-GT含量較模型組無(wú)明顯差別（P>0.05），AST、AKP含量均較模型組顯著降低（P<0.05）。（4）與正常組比較，模型組大鼠血清MDA含量明顯升高（19.06±1.70 VS7.18±1.37P<0.01），SOD、GSH-

9、Px含量明顯降低（SOD：117.23±10.16VS186.15±9.92，P<0.05；GSH-Px：788.50±93.58VS982.63±190.08，P<0.01）。與模型組比較，中藥高劑量組、中藥低劑量組、凱西萊組大鼠血清MDA含量顯著降低（P<0.05，P<0.01），而SOD、GSH-Px含量明顯升高（P<0.05，P<0.01）。與中藥低劑量組比較，中藥高劑量組大鼠血清MDA含量顯著降低（10.73±1.01VS13

10、.06±1.45P<0.05），SOD、GSH-Px含量顯著升高（SOD：153.83±15.27 VS131.88±10.21.P<0.05；GSH-Px：968.13±117.32 VS923.63±110.89，P<0.05）。與凱西萊組比較，中藥高劑量組大鼠血清MDA含量無(wú)差別（10.73±1.01 VS10.35±2.32，P>0.05），SOD、GSH-Px含量明顯升高（SOD：153.83±15.27VS137.38±14

11、.94.P<0.05；GSH-Px：968.13±117.32VS933.63±149.43，P<0.05）。與凱西萊組比較，中藥低劑量組大鼠血清MDA、SOD、GSH-Px含量無(wú)明顯差別（P>0.05）。（5）模型組大鼠血清LPS、TNF-α含量較正常組顯著升高（LPS：91.50±26.82 VS21.66±12.71.P<0.05；TNF-α：0.70±0.12VS0.41±0.16，P<0.01）。與模型組比較，中藥高劑量組、中

12、藥低劑量組、凱西萊組大鼠血清LPS、TNF-α含量顯著降低（P<0.05，P<0.01）。與中藥低劑量組比較，凱西萊組、中藥高劑量組大鼠血清LPS、TNF-α含量顯著降低（LPS：46.50±39.06VS65.50±27.78，P<0.05；TNF-α：0.48±0.12VS0.57±0.11，P<0.05；LPS：36.33±111.09VS65.50±27.78，P<0.05；TNF-α：0.45±0.12VS0.57±0.11，

13、P<0.05）。與凱西萊組比較，中藥高劑量組大鼠血清LPS、TNF-α含量無(wú)明顯差別（P>0.05）。（6）對(duì)肝組織HE染色的影響：正常組大鼠肝臟肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞排列整齊，胞核多居中，肝細(xì)胞索以肝小葉中央靜脈為中心呈放射排列，規(guī)則有序；模型組肝臟小葉結(jié)構(gòu)消失，中度脂肪變，肝細(xì)胞變大，腫脹，大小不均，胞漿內(nèi)脂滴大小不一，以小泡性脂肪滴為主，.細(xì)胞核在中央，肝竇略狹窄，病變以中央靜脈周?chē)顬槊黠@，伴炎細(xì)胞浸潤(rùn)和輕度的肝細(xì)胞水樣變性及散

14、在點(diǎn)狀壞死灶；中藥低劑量組、凱西萊組較模型組，肝臟脂肪變性減輕，出現(xiàn)局限性輕度脂肪變，肝內(nèi)炎細(xì)胞浸潤(rùn)、肝細(xì)胞壞死程度明顯減輕；中藥高劑量組肝小葉結(jié)構(gòu)正常清晰，肝細(xì)胞索排列規(guī)則。局限性細(xì)胞輕度脂肪變，偶見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，未見(jiàn)肝細(xì)胞壞死灶。
　　 結(jié)論：1化濁解毒方能夠明顯改善酒精性肝病大鼠血脂水平、肝功能及肝臟病理組織學(xué)改變，對(duì)酒精性肝病確具有良好的治療作用。2化濁解毒方治療酒精性肝病的作用機(jī)制可能與其能清除自由基，抗脂質(zhì)過(guò)氧化，減輕