鼠李糖乳桿菌對酒精性肝病的預(yù)防作用及分子機(jī)制研究.pdf

1、酒精性肝病是臨床上常見的肝臟疾病，主要是由于長時(shí)間大量飲用各種含酒精的飲料所引發(fā)的肝臟損害性病變。雖然近年來在酒精性肝病發(fā)病的分子機(jī)制研究方面取得了突破性的進(jìn)展，但針對治療酒精性肝病的有效措施尚有待研究。因此對酒精性肝病的研究日益引起了廣泛的關(guān)注，是當(dāng)前急需研究和解決的重要醫(yī)學(xué)課題之一。
　　益生菌具有抑制腸道內(nèi)革蘭氏陰性細(xì)菌生長、保護(hù)腸上皮細(xì)胞的屏障功能，從而阻止內(nèi)毒素從腸道轉(zhuǎn)移到肝臟，因此國內(nèi)外研究學(xué)者開始把益生菌作為研究預(yù)防

2、治療酒精性肝病的新途徑，其中鼠李糖乳桿菌的效果較為顯著。相對于其他益生菌來說鼠李糖乳桿菌耐腸道酸性環(huán)境的能力較強(qiáng)，具有較強(qiáng)的定植及黏附能力，能夠有效地調(diào)整腸道菌群結(jié)構(gòu)，改善腸道屏障功能，提高機(jī)體免疫力。但鼠李糖乳桿菌治療酒精性肝病的研究機(jī)制及其潛在的應(yīng)用價(jià)值還有待繼續(xù)深入的發(fā)掘。
　　越來越多的研究認(rèn)為長期飲酒會增加腸道通透性，改變緊密連接以及促使腸道菌群發(fā)生異常。本論文旨在研究腸道屏障功能和腸源性內(nèi)毒素在酒精性肝病中的作用，探討

3、鼠李糖乳桿菌對于酒精性肝病保護(hù)作用的分子機(jī)制。
　　本研究首先通過建立8周慢性酒精性肝損傷模型，觀察到對照組小鼠在慢性酒精喂養(yǎng)后肝臟脂肪堆積以及肝損傷明顯，而喂食含有鼠李糖乳桿菌(LGG)的實(shí)驗(yàn)組小鼠顯著改善了肝臟脂肪堆積及肝損傷情況。同時(shí)LGG能夠抑制酒精介導(dǎo)的腸道緊密連接蛋白ZO-1、Claudin-1及Occludin的表達(dá)，并增強(qiáng)HIF介導(dǎo)的ITF、HIF-2α的信號途徑從而改善酒精引起的腸屏障功能障礙。
　　由于凋

4、亡的益生菌菌體及其代謝物仍具有一定的生理活性，為此本論文利用鼠李糖乳桿菌上清液(LGGs)作為活益生菌的替代物，通過給予雄性C57BL/6N小鼠急性酒精灌胃建立急性酒精性肝損傷模型，研究發(fā)現(xiàn)LGGs同樣具有改善小鼠肝臟脂肪堆積及肝損傷的作用，并且也同樣地抑制酒精介導(dǎo)的緊密連接蛋白ZO-1、Claudin-1及Occludin的表達(dá)，同時(shí)通過增強(qiáng)ITF、Cathelin相關(guān)抗菌肽(CRAMP)及HIF-1α、HIF-2α等來改善腸屏障功能

5、障礙。
　　為了進(jìn)一步證實(shí)LGGs對酒精性肝損傷的保護(hù)作用，采用Caco-2結(jié)腸癌細(xì)胞系建立體外腸上皮細(xì)胞屏障模型，觀察到LGGs對酒精損傷的Caco-2細(xì)胞同樣具有保護(hù)功能，能夠改善上皮細(xì)胞屏障完整性和通透性。
　　為了進(jìn)一步研究酒精刺激后腸道緊密連接蛋白的調(diào)節(jié)機(jī)制，本研究通過慢性酒精性肝損傷模型以及Caco-2體外腸上皮細(xì)胞屏障模型，觀察到LGGs能夠有效降低miR122a的表達(dá)水平，同時(shí)發(fā)現(xiàn)酒精介導(dǎo)occludin的表

6、達(dá)主要由miR122a調(diào)節(jié)。
　　通過慢性酒精喂養(yǎng)小鼠4周后觀察到肝組織細(xì)胞凋亡現(xiàn)象顯著增加，而LGGs作用后肝細(xì)胞凋亡現(xiàn)象得到明顯改善，抗細(xì)胞凋亡蛋白Bcl-2在肝臟組織中的表達(dá)水平升高，促細(xì)胞凋亡蛋白Bax的表達(dá)水平降低，進(jìn)一步證明了LGGs通過減少肝細(xì)胞凋亡改善慢性酒精性脂肪性肝病，進(jìn)而有效預(yù)防慢性酒精引起的肝損傷。
　　本研究通過建立體外細(xì)胞模型以及體內(nèi)動物模型，系統(tǒng)地探討了鼠李糖乳桿菌在預(yù)防和治療酒精性肝病中的重要