RGD接枝聚（羥基乙酸-L-賴氨酸-乳酸）-PDLLA-β-TCP復(fù)合材料用于周圍神經(jīng)缺損修復(fù)的研究.pdf

1、本文研究了一種用于橋接周圍神經(jīng)缺損的新型復(fù)合膜材料。首先合成了RGD接枝的高分子聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-乳酸)(簡稱PRGD)，通過物理共混一定比例的聚乳酸(PDLLA)、β-磷酸三鈣(β-TCP)制備了PRGD/PDLLA/β-TCP復(fù)合膜。通過體外細胞培養(yǎng)和體內(nèi)動物實驗對其進行生物學(xué)評價，探討其在神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域中的應(yīng)用。 以Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸與溴乙酰溴為起始原料，經(jīng)?；P(guān)環(huán)兩步反應(yīng)，成功合成單體3S-[4-(芐氧羰

2、基氨基)丁基]-嗎啉-2,5-二酮，該單體純化后與D，L-丙交酯開環(huán)共聚合生成聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-乳酸)，對其進行了FT-IR，1H-NMR和13C-NMR表征，其組成可根據(jù)單體3S-[4-(芐氧羰基氨基)丁基]-嗎啉-2,5-二酮和D，L-丙交酯投料比的不同在較大范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。以Pd/C為催化劑，將聚(羥基乙酸-Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸-乳酸)加氫脫保護，得到帶有活性側(cè)氨基的高分子聚(羥基乙酸-L-賴氨酸.乳酸)

3、，1H-NMR測試結(jié)果顯示保護基團芐氧羰基已經(jīng)脫除。在側(cè)氨基上用化學(xué)法偶聯(lián)接枝促細胞黏附多肽RGD，氨基酸測試(AAA)結(jié)果表明接枝量為12.7～14.3μmol/g。 將PRGD和PDLLA以1:1的質(zhì)量比配制成濃度為10％的乙酸乙酯溶液，混入適量β-TCP粉末，磁力攪拌作用下均勻分散，采用溶液澆注法在室溫下制備PRGD/PDLLA/β-TCP復(fù)合膜。由靜態(tài)水接觸角測試評價材料的親/疏水性，其結(jié)果顯示PRGD/PDLLA/β-

4、TCP復(fù)合膜親水性較聚乳酸有顯著改善。 采用直接接觸法將材料與RSC96雪旺細胞共培養(yǎng)，研究RGD接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-乳酸)與雪旺細胞的相容性。掃描電鏡下觀察細胞在材料表面的黏附與鋪展情況，結(jié)果表明RGD接枝聚(羥基乙酸-L-賴氨酸-乳酸)/PDLLA復(fù)合材料與雪旺細胞良好的親和性，適宜用于神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域。 采用大鼠坐骨神經(jīng)缺損模型對PRGD/PDLLA/β-TCP復(fù)合材料進行了體內(nèi)生物學(xué)評價。自體神經(jīng)移植作為對