白介素-1β和γ-干擾素在升主動(dòng)脈瘤和Ⅰ型胸主動(dòng)脈夾層中的表達(dá)研究.pdf

1、胸主動(dòng)脈瘤(Thoracic aortic aneurysm,TAA)和胸主動(dòng)脈夾層(Thoracic aorticdissection,TAD)是血管外科常見的致死性疾病,病理改變主要為胸主動(dòng)脈處形成瘤樣擴(kuò)張,因此又可統(tǒng)稱為胸主動(dòng)脈擴(kuò)張性疾病。TAA和TAD的發(fā)病機(jī)制至今不明,胸主動(dòng)脈管壁的薄弱被認(rèn)為是和血流動(dòng)力學(xué)異常同等重要的病因之一。然而,什么原因?qū)е铝斯鼙诘谋∪跫捌渚唧w作用機(jī)制尚不明確。不僅如此,由于發(fā)病機(jī)制不明,TAA和TAD

2、的手術(shù)時(shí)機(jī)和手術(shù)方式的選擇,目前的爭議也較大。因此,對胸主動(dòng)脈管壁的研究,不僅可以為TAD和TAA發(fā)病機(jī)制的闡明提供依據(jù),更有助于手術(shù)方式和時(shí)機(jī)的選擇,甚至可以為TAD和TAA的內(nèi)科藥物治療提供可能的分子靶點(diǎn)。 研究目的：1)通過研究胸主動(dòng)脈管壁的平滑肌細(xì)胞凋亡情況,基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表達(dá),白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)和γ-干擾素(I

3、nterferon-γ,INF-γ)的表達(dá)和定位及其與臨床相關(guān)參數(shù)的關(guān)系,來推測IL-1β和INF-γ在TAD和TAA形成過程中的可能作用；2)通過研究信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白p38和JNK蛋白在TAD和TAA的表達(dá)和定位,初步探討IL-1β和INF-γ在TAD和TAA中的可能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式,為IL-1β和INF-γ在TAD和TAA發(fā)病中的作用奠定理論基礎(chǔ)。 研究方法：1)選取2005年2月-2007年3月間本院手術(shù)切除的11例TAD標(biāo)本和1

4、0例TAA標(biāo)本,另取7例非主動(dòng)脈疾病的主動(dòng)脈管壁為正常對照,TUNEL染色觀察管壁平滑肌細(xì)胞凋亡情況,免疫組織化學(xué)染色觀察胸主動(dòng)脈中膜IL-1β、IFN-γ和MMP-9陽性細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞定位,免疫蛋白印跡和實(shí)時(shí)定量PCR分析7例TAD標(biāo)本和6例TAA標(biāo)本中膜IL-1β和IFN-γ的蛋白和mRNA含量,將管壁平滑肌細(xì)胞凋亡情況,IL-1γ、IFN-γ和MMP-9表達(dá)情況與臨床相關(guān)參數(shù)(年齡、吸煙、高血壓、白細(xì)胞、主動(dòng)脈最大直徑等)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、分析,找出與IL-β和IFN-γ表達(dá)可能相關(guān)的臨床危險(xiǎn)因素；2)對7例TAD標(biāo)本和6例TAA標(biāo)本管壁磷酸化p38和JNK蛋白進(jìn)行免疫組織化學(xué)和免疫蛋白印跡分析,并與IL-1β和IFN-γ蛋白含量進(jìn)行相關(guān)性分析,找出其與IL-1β和IFN-γ的可能關(guān)系,推測IL-1β和IFN-γ在細(xì)胞內(nèi)的可能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式。 結(jié)果：1)IL-1β的蛋白含量在TAA和TAD組中表達(dá)較對照組為高(P<.0001),TAA組中表達(dá)較TAD組高(P=0.0

6、002),主要分布于主動(dòng)脈管壁平滑肌細(xì)胞和炎性細(xì)胞(T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)的細(xì)胞漿中；IFN-γ的蛋白含量在TAA組中表達(dá)較TAD和對照組為高(P<.0001和P=0.0002),主要分布于主動(dòng)脈管壁炎性細(xì)胞的細(xì)胞漿中,TAD和對照組蛋白含量無明顯差異(P=0.2335);TAA和TAD組中MMP-9的陽性細(xì)胞數(shù)和染色程度較對照組為高(P=0.0098和P=0.0023),主要分布于主動(dòng)脈管壁平滑肌細(xì)胞和炎性細(xì)胞的細(xì)胞漿中。2)TAD組主動(dòng)

7、脈管壁炎性細(xì)胞中IL-1β和MMP-9的陽性細(xì)胞數(shù)和染色程度呈正相關(guān)；TAA組主動(dòng)脈管壁炎性細(xì)胞中IFN-γ和MMP-9的陽性細(xì)胞數(shù)和染色程度呈正相關(guān)。3)TAD和TAA組細(xì)胞凋亡較對照組明顯升高(P<.0001和P=0.0001),TAD組較TAA組明顯升高(P<.0001);TAA組IFN-γ蛋白含量與動(dòng)脈直徑呈正相關(guān)(P=0.0012),TAD組IFN-γ蛋白含量與全身白細(xì)胞數(shù)和平滑肌細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān)(P=0.0025和P=0

8、.0212),TAA組動(dòng)脈壁炎性細(xì)胞中IFN-γ陽性細(xì)胞數(shù)和染色程度在高血壓組中較非高血壓組為高且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.0333)。4)磷酸化的p38蛋白含量在TAD和TAA組中與IL-1β的表達(dá)量呈正相關(guān)(P=0.0362和P=0.0416),磷酸化的p38蛋白和JNK蛋白與IL-1β和IFN-γ的染色細(xì)胞分布基本一致。 結(jié)論：1)TAA中IL-1β和INF-γ高表達(dá),INF-γ可能通過增加炎性細(xì)胞中MMP-9的表達(dá)和主動(dòng)脈管