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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察PPARγ(過(guò)氧化物體增殖物激活受體)激動(dòng)劑吡格列酮預(yù)處理,對(duì)心肌缺血再灌注所致的細(xì)胞凋亡及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特有伴侶蛋白GRP78、凋亡水解酶caspase-12表達(dá)的影響,探討吡格列酮在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑的心肌保護(hù)作用。
方法:
健康雄性Wistar大鼠,體重200±30g,隨機(jī)分為假手術(shù)組,缺血再灌注組(I/R組)以及吡格列酮預(yù)處理組。I/R組及假手術(shù)組灌服生理鹽水,2ml/d,共7d,吡格列
2、酮預(yù)處理組再分為3組,分別給予吡格列酮3mg/kg.d(低劑量組),lOmg/kg.d(中劑量組),20mg/kg.d(高劑量組),溶于2ml生理鹽水中灌胃,共7d。制作大鼠心肌缺血再灌注損傷模型:氣管插管、動(dòng)物呼吸機(jī)維持呼吸,監(jiān)測(cè)心電圖變化,開(kāi)胸,結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支30min,再灌注2h。造模成功后腹主動(dòng)脈采血,離心,分離血清,采用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)各組血清中LDH、CK-MB水平;取出心臟,洗凈血污,留取左心室前壁,石蠟包埋、切片后,
3、采用TUNEL(原位末端標(biāo)記)染色法檢測(cè)各組心肌細(xì)胞凋亡數(shù),采用SABC(鏈酶親和素一過(guò)氧化物酶)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)GRP78及caspase-12蛋白的表達(dá),并對(duì)其表達(dá)進(jìn)行半定量分析。
結(jié)果:
1.I/R組大鼠血清中LDH、CK-MB水平均明顯高于假手術(shù)組(p<0.05),不同劑量吡格列酮預(yù)處理后血清LDH、CK-MB水平明顯低于I/R組(p<0.05),但吡格列酮3mg組和lOmg組相比無(wú)顯著差異(p>0
4、.05)。2.I/R組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)比假手術(shù)組明顯增多(p<0.05)。低、中、高劑量吡格列酮預(yù)處理各組的細(xì)胞凋亡指數(shù)較I/R組顯著降低(p<0.05),吡格列酮3mg組和lOmg組相比無(wú)顯著差異(p>0.05)。3.I/R心肌組織中caspase-12、GRP78蛋白的表達(dá)與假手術(shù)組比較明顯升高(p<0.05)、給予大鼠吡格列酮預(yù)處理治療后,再作缺血再灌注模型,3種劑量吡格列酮預(yù)處理組與l/R組比較都顯著減少了心肌細(xì)胞蛋白GRP78
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