吡格列酮對(duì)缺血再灌注大鼠心肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激致凋亡途徑的影響.pdf

1、目的:
　　 觀察PPARγ（過(guò)氧化物體增殖物激活受體）激動(dòng)劑吡格列酮預(yù)處理，對(duì)心肌缺血再灌注所致的細(xì)胞凋亡及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特有伴侶蛋白GRP78、凋亡水解酶caspase-12表達(dá)的影響，探討吡格列酮在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑的心肌保護(hù)作用。
　　 方法:
　　 健康雄性Wistar大鼠，體重200±30g，隨機(jī)分為假手術(shù)組，缺血再灌注組（I/R組）以及吡格列酮預(yù)處理組。I/R組及假手術(shù)組灌服生理鹽水，2ml/d，共7d，吡格列

2、酮預(yù)處理組再分為3組，分別給予吡格列酮3mg/kg.d（低劑量組），lOmg/kg.d（中劑量組），20mg/kg.d（高劑量組），溶于2ml生理鹽水中灌胃，共7d。制作大鼠心肌缺血再灌注損傷模型:氣管插管、動(dòng)物呼吸機(jī)維持呼吸，監(jiān)測(cè)心電圖變化，開(kāi)胸，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支30min，再灌注2h。造模成功后腹主動(dòng)脈采血，離心，分離血清，采用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)各組血清中LDH、CK-MB水平;取出心臟，洗凈血污，留取左心室前壁，石蠟包埋、切片后，

3、采用TUNEL（原位末端標(biāo)記）染色法檢測(cè)各組心肌細(xì)胞凋亡數(shù)，采用SABC（鏈酶親和素一過(guò)氧化物酶）免疫組織化學(xué)法檢測(cè)GRP78及caspase-12蛋白的表達(dá)，并對(duì)其表達(dá)進(jìn)行半定量分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.I/R組大鼠血清中LDH、CK-MB水平均明顯高于假手術(shù)組(p＜0.05），不同劑量吡格列酮預(yù)處理后血清LDH、CK-MB水平明顯低于I/R組(p＜0.05)，但吡格列酮3mg組和lOmg組相比無(wú)顯著差異（p＞0

4、.05）。2.I/R組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)比假手術(shù)組明顯增多(p＜0.05)。低、中、高劑量吡格列酮預(yù)處理各組的細(xì)胞凋亡指數(shù)較I/R組顯著降低(p＜0.05)，吡格列酮3mg組和lOmg組相比無(wú)顯著差異(p＞0.05)。3.I/R心肌組織中caspase-12、GRP78蛋白的表達(dá)與假手術(shù)組比較明顯升高(p＜0.05)、給予大鼠吡格列酮預(yù)處理治療后，再作缺血再灌注模型,3種劑量吡格列酮預(yù)處理組與l/R組比較都顯著減少了心肌細(xì)胞蛋白GRP78