腎陽虛證膝骨關(guān)節(jié)炎的差異基因表達(dá)譜研究.pdf

1、目的：以腎陽虛證膝骨關(guān)節(jié)炎為樣品研究腎陽虛證的差異基因表達(dá)譜，在前期研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步分析腎陽虛證的基因表達(dá)譜及分子通路，探討腎陽虛證發(fā)病的微觀分子機(jī)制。 方法：應(yīng)用基因芯片技術(shù)，通過病證結(jié)合的方法，精選兩組來自不同地區(qū)典型腎陽虛證膝骨關(guān)節(jié)炎病人和正常對照組各8例，作以下評定：植物神經(jīng)系數(shù)測定?；蛐酒瑢?shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)流程包括采血，提取RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，用Cy3和Cy5兩種熒光物質(zhì)分別標(biāo)記，制備成探針，在22000

2、點(diǎn)的基因芯片上進(jìn)行雜交，通過計(jì)算機(jī)掃描后，得到兩張病人一正常對照組混合樣品表達(dá)譜數(shù)據(jù)。 結(jié)果：病例篩選結(jié)果：兩組患者腎陽虛證因子定性定量積分相加均大于18分，為典型腎陽虛證；經(jīng)骨科專家和x線檢查系膝骨關(guān)節(jié)炎患者。植物神經(jīng)系數(shù)：兩組患者與對照組比較均未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。差異基因表達(dá)譜：芯片1得到75條差異表達(dá)基因，上調(diào)49條，下調(diào)26條：簽片2得到1302條差異表達(dá)基因，上調(diào)291條，下調(diào)1011條；兩張芯片共同出現(xiàn)的差異表達(dá)基因有

3、6條。兩組差異表達(dá)基因生物學(xué)過程均以代謝基因所占的比例最大，分別占70％和63.06％，且集中在基礎(chǔ)代謝和細(xì)胞代謝，其次為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)基因，還涉及到免疫反應(yīng)等；通路查詢以代謝通路和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的基因最多，主要集中于MAPK信號通路和氧化磷酸化通路。 討論：本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示腎陽虛證的差異基因表達(dá)譜主要集中于代謝類尤其是細(xì)胞代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和免疫類基因；特別是某些與代謝、免疫、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的多生物學(xué)過程基因與腎陽虛證的關(guān)系值得進(jìn)一步研究，提