復(fù)方鄰苯二甲醛的消毒性能及消毒機(jī)理研究.pdf

1、[目的] 研究復(fù)方鄰苯二甲醛對(duì)細(xì)菌的殺滅效果以及有機(jī)物、溫度等因素對(duì)殺滅效果的影響，并評(píng)價(jià)其金屬腐蝕性及毒性：通過(guò)測(cè)定漏出蛋白質(zhì)、DNA的含量初步探討復(fù)方鄰苯二甲醛對(duì)細(xì)菌的作用機(jī)理，借助透射電鏡研究經(jīng)復(fù)方鄰苯二甲醛作用后龜分枝桿菌膿腫亞種超微結(jié)構(gòu)及屏障功能的變化，進(jìn)一步探討其作用機(jī)理。 [方法] 1實(shí)驗(yàn)方法 以枯草桿菌黑色變種芽孢、龜分枝桿菌膿腫亞種、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌和白色念珠菌為試

2、驗(yàn)菌株對(duì)復(fù)方鄰苯二甲醛進(jìn)行中和劑懸液定量鑒定試驗(yàn)、懸液定量殺菌試驗(yàn)、有機(jī)物、溫度、防銹劑影響試驗(yàn)及能量試驗(yàn)：并進(jìn)行金屬腐蝕性試驗(yàn)、小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)及蓄積毒性試驗(yàn)；通過(guò)菌藥混合液中漏出蛋白質(zhì)、DNA的檢測(cè)及透射電鏡觀察復(fù)方鄰苯二甲醛作用后龜分枝桿菌超微結(jié)構(gòu)及屏障功能的變化，初步探討復(fù)方鄰苯二甲醛的消毒機(jī)理。 2統(tǒng)計(jì)方法 懸液定量殺菌試驗(yàn)中，以點(diǎn)計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的存活菌落數(shù)，分別進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后，兩者相減，計(jì)算對(duì)數(shù)

3、降低值。采用SPSS¨．5軟件，對(duì)復(fù)方鄰苯二甲醛殺菌效果及其影響因素試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)方差分析，并用Excel2003作線圖分析數(shù)據(jù)趨勢(shì)。 [結(jié)果] l復(fù)方鄰苯二甲醛對(duì)微生物的殺滅作用 1．1復(fù)方鄰苯二甲醛殺滅枯草桿菌黑色變種芽孢的影響因素 含OPA5000mg/L復(fù)方鄰苯二甲醛在溫度為lO±1℃、20±l℃、30±1℃時(shí)分別作用枯草桿菌黑色變種芽孢40min，平均殺滅對(duì)數(shù)值分別為0．48、4．03

4、、7．43：含體積分?jǐn)?shù)為25％、50％小牛血清的枯草桿菌黑色變種芽孢經(jīng)復(fù)方鄰苯二甲醛作用60min，其平均殺滅對(duì)數(shù)值均大于7．00~含OPA1000mg/L、2500mg/L、5000mg/L的復(fù)方鄰苯二甲醛分別作用枯草桿菌黑色變種芽孢30min，平均殺滅對(duì)數(shù)值分別為2．10、2．43、4．21，加入防銹劑后其平均殺滅對(duì)數(shù)值分別為2．02、2．54、5．12。 1．2復(fù)方鄰苯二甲醛對(duì)龜分枝桿菌膿腫亞種殺滅效果及有機(jī)物影響試驗(yàn)

5、 含OPA100、250、500mg／L的復(fù)方鄰苯二甲醛作用5min對(duì)龜分枝桿菌膿腫亞種平均殺滅對(duì)數(shù)值分別為0．93、3．68、7．40。含體積分?jǐn)?shù)為25％小牛血清的龜分枝桿菌膿腫亞種經(jīng)含OPA250、500mg/L的復(fù)方鄰苯二甲醛分別作用40min、15min，平均殺滅對(duì)數(shù)值均大于4．00；而體積分?jǐn)?shù)為50％小牛血清組經(jīng)含OPA250、500mg／L的復(fù)方鄰苯二甲醛分別作用40min、20min，平均殺滅對(duì)數(shù)值分別為1．54、4．

6、63。 2復(fù)方鄰苯二甲醛對(duì)銅綠假單胞菌能量試驗(yàn)結(jié)果 含OPAl000mg/L復(fù)方鄰苯二甲醛第1次和第2次移種的5管樣本中，分別有2管以上不長(zhǎng)菌，該消毒劑的最低合格濃度為1000mg／L。 3復(fù)方鄰苯二甲醛金屬腐蝕性試驗(yàn) 未加防銹劑含OPA5000mg／L復(fù)方鄰苯二甲醛溶液對(duì)不銹鋼的腐蝕速率為0．0000，對(duì)銅、鋁的腐蝕速率分別為0．0222、0．0414，對(duì)碳鋼的腐蝕速率為O．1783。而添加防銹劑后含O

7、PA5000mg/L復(fù)方鄰苯二甲醛溶液對(duì)碳鋼、銅、鋁、不銹鋼的腐蝕速率均小于0．0100。 4毒理學(xué)試驗(yàn) 復(fù)方鄰苯二甲醛對(duì)小鼠急性經(jīng)口毒性LD50>5000mg/(kg．bw)，4日劑量遞增蓄積毒性試驗(yàn)表明復(fù)方鄰苯二甲醛的蓄積毒性分級(jí)為K≥5。 5枯草桿菌黑色變種芽孢、龜分枝桿菌膿腫亞種、細(xì)菌繁殖體經(jīng)復(fù)方鄰苯二甲醛作用后蛋白質(zhì)、DNA漏出情況 枯草桿菌黑色變種芽孢經(jīng)含OPA5000mg/L復(fù)方鄰苯二甲醛作

8、用不同時(shí)間后，有不等量的蛋白質(zhì)漏出：龜分枝桿菌膿腫亞種經(jīng)不同濃度的復(fù)方鄰苯二甲醛作用后，無(wú)蛋白質(zhì)漏出：細(xì)菌繁殖體經(jīng)OPA含量大于500mg/L的復(fù)方鄰苯二甲醛作用后，無(wú)蛋白質(zhì)漏出，經(jīng)OPA含量小于50mgm復(fù)方鄰苯二甲醛作用后有不等量的蛋白質(zhì)漏出。各種試驗(yàn)菌經(jīng)不同濃度的復(fù)方鄰苯二甲醛作用后均無(wú)DNA漏出。 6經(jīng)復(fù)方鄰苯二甲醛作用后龜分枝桿菌超微結(jié)構(gòu)變化情況 透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)經(jīng)含OPA250mg／L復(fù)方鄰苯二甲醛作用1、5

9、、10min后，龜分枝桿菌細(xì)胞壁仍較完整未見(jiàn)明顯變化，隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)，胞質(zhì)中空白區(qū)域增多，菌體擬核區(qū)核酸凝固成團(tuán)、部分細(xì)胞可見(jiàn)質(zhì)壁分離。 [結(jié)論] 復(fù)方鄰苯二甲醛可高效、快速滅活枯草桿菌黑色變種芽孢、龜分枝桿菌膿腫亞種等細(xì)菌，其消毒效果受溫度、有機(jī)物等外界因素影響，對(duì)不銹鋼、銅、鋁、碳鋼4種金屬腐蝕性小，用于醫(yī)療器械消毒具有使用濃度低、時(shí)間短、毒性低的優(yōu)點(diǎn)。蛋白質(zhì)漏出試驗(yàn)、DNA漏出試驗(yàn)、電鏡觀察結(jié)果表明復(fù)方鄰苯二甲