鄰苯二甲酸丁基芐酯小鼠神經(jīng)毒性的體內(nèi)和體外研究.pdf

1、目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了有關(guān)于鄰苯二甲酸丁基芐酯(Butyl benzyl phthalate，BBP)的生殖、發(fā)育、氧化損傷及內(nèi)分泌具有一定的毒性干擾作用，然而B(niǎo)BP對(duì)動(dòng)物和人類(lèi)的神經(jīng)毒性以及BBP在體內(nèi)具體的作用機(jī)制究竟是怎么樣的呢？目前還尚待進(jìn)一步深入的進(jìn)行研究與探索。
　　本研究采用體外細(xì)胞活力測(cè)定、神經(jīng)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、凋亡作用和體內(nèi)整體動(dòng)物小鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)、酶活測(cè)定、顯微熒光技術(shù)相結(jié)合的實(shí)驗(yàn)方法，來(lái)進(jìn)行BBP神經(jīng)毒性的綜合評(píng)價(jià)。本

2、研究還平行比較了BBP、DBP以及它們共同的代謝產(chǎn)物MBP對(duì)細(xì)胞的毒性效應(yīng);通過(guò)對(duì)腦組織切片進(jìn)行分析、神經(jīng)遞質(zhì)的變化情況來(lái)初步探討B(tài)BP對(duì)小鼠學(xué)習(xí)與記憶能力的影響情況以及可能存在的分子機(jī)制。
　　本研究在體外研究中主要是通過(guò)MTT法和Hoechst33258染色來(lái)進(jìn)行鄰苯二甲酸丁基芐酯的細(xì)胞毒性評(píng)價(jià);通過(guò)對(duì)染毒細(xì)胞ROS、MDA、GSH含量的檢測(cè)來(lái)探究BBP對(duì)小鼠神經(jīng)瘤細(xì)胞的氧化損傷效應(yīng)。分別采用濃度為的BBP、DBP、MBP來(lái)染

3、毒細(xì)胞，通過(guò)對(duì)染毒細(xì)胞ROS、MDA、GSH含量的檢測(cè)來(lái)比較這三種物質(zhì)對(duì)小鼠神經(jīng)瘤細(xì)胞的毒性強(qiáng)弱。
　　在進(jìn)行體內(nèi)試驗(yàn)時(shí)，利用一系列的濃度梯度分別為0（對(duì)照組），50，250及1，250mg/kg的BBP連續(xù)兩個(gè)周對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行灌胃染毒，同時(shí)通過(guò)一系列的行為學(xué)經(jīng)典實(shí)驗(yàn):Morris水迷宮，懸尾試驗(yàn)以及強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)，反映BBP對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。分別測(cè)定了腦、肝、腎組織的氧化損傷水平。為了進(jìn)一步探究BBP毒性的可能存在的分子機(jī)

4、制，測(cè)得了左腦組織中5-HT((5-hydroxytryptamine)和p-CREB含量的變化情況。
　　根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)BBP對(duì)細(xì)胞和組織均有損傷作用。大腦海馬切片圖顯示，隨著B(niǎo)BP的暴露，小鼠海馬區(qū)細(xì)胞不完整性逐漸在增加，當(dāng)BBP的暴露濃度達(dá)到了最高濃度組即1，250mg/kg時(shí)，海馬區(qū)細(xì)胞開(kāi)始凋亡，而且約有1/3的背側(cè)海馬細(xì)胞（控制小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力）受到損傷，BBP高濃度的暴露造成了海馬CA1區(qū)與DG區(qū)的神經(jīng)元表現(xiàn)出遲