幾種鄰苯二甲酸酯對蚯蚓(Eisenia fetida)的分子毒性機理研究.pdf

1、鄰苯二甲酸酯類(PAEs)的污染對生態(tài)系統(tǒng)形成了嚴重威脅，蚯蚓是土壤生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分和類群最大的一類生物，利用蚯蚓作為指示生物來反映土壤污染狀況，為合理評價土壤生態(tài)安全提供科學依據(jù)。本研究選擇3種鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)(DMP、DEP、DBP)，以赤子愛勝蚓(Eisenia foetida)為研究對象，從個體水平，細胞水平和大分子水平研究其毒性效應(yīng)。同時還以人乳腺癌雌激素受體陽性細胞株MCF-7采用體外試驗方法研究了DMP、DEP和D

2、BP的類雌激素效應(yīng)，彌補了當前關(guān)于PAEs的內(nèi)分泌干擾性能方面資料的不足，為全面評價PAEs化合物的毒性作用提供了科學依據(jù)。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　(1)采用濾紙接觸法，研究DMP、DEP對赤子愛勝蚓(Eisenia foetida)的急性毒性效應(yīng)，實驗結(jié)果表明:蚯蚓對DMP、DEP兩者表現(xiàn)出相似的中毒癥狀，染毒48 h時，DMP的LD50為129.603μg/cm2，DEP的LD50為145.336μg/cm2。采用

3、自然土壤法研究DMP、DEP對蚯蚓的急性毒性效應(yīng)，實驗結(jié)果表明:染毒14d時，DMP的LD50為1560.120 mg/kg，DEP的LD50為1516.186 mg/kg。
　　(2)采用自然土壤法，研究DMP、DEP和DBP對赤子愛勝蚓(Eisenia foetida)的體重和超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和乙酰膽堿酯酶(AChE)活性的影響，以及蚯蚓體腔細胞溶酶體膜對中性紅保留時間(NRRT)的影響。結(jié)果表明

4、:隨著DMP、DEP和DBP作用濃度加大，暴露時間延長，蚯蚓體重抑制率逐漸升高。DMP、DEP和DBP作用時，CAT活性的時間效應(yīng)和濃度效應(yīng)均有顯著性變化，SOD酶濃度效應(yīng)顯著但時間效應(yīng)并不顯著，不同濃度的DEP和DBP對蚯蚓組織乙酰膽堿酯酶(AChE)的脅迫效應(yīng)相似，都表現(xiàn)為先抑制后誘導(dǎo)，并在28 d時酶活性恢復(fù)到對照組水平或有恢復(fù)的趨勢。NRRT隨著DMP、DEP和DBP濃度的增大和暴露時間的延長而降低。
　　(3)采用人乳腺

5、癌雌激素受體陽性細胞株MCF-7，通過MTT法檢測17β-E2和DMP、DEP、DBP對細胞活力的影響，并以GAPDH為內(nèi)參，檢測DMP、DEP、DBP對細胞內(nèi)幾種雌激素受體基因表達的影響。結(jié)果表明:10-12～10-6mol/L濃度的17β-E2和10-7～10-3 mol/L濃度的DMP、DEP、DBP均能夠促進細胞活力上升，其誘導(dǎo)細胞活力最大時的濃度分別為10-9 mol/L和10-4 mol/L、10-4 mol/L、10-5